Question

【题目】培育乳汁中含有人凝血因子IX医用蛋白的二倍体转基因绵羊的简易流程如图所示。请回答下列有关问题：

（1）图中①表示_____________的过程，为了使目的基因在转基因绵羊的乳腺细胞中成功表达，需将人凝血因子Ⅸ基因与___________等调控组件重组在一起，且使目的基因的位置处于______________________。

（2）重组细胞的细胞核来自______________________。为了获得绵羊胎儿的单个成纤维细胞，___________（填“能”或“不能”）使用胃蛋白酶处理绵羊组织块，理由是______________________。

（3）③过程中，采取___________的方法促使重组细胞的形成。

（4）④过程所用培养液的成分比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需添加___________（答出三种即可）。

Answer 1

【答案】构建基因表达载体 乳腺蛋白基因的启动子 启动子和终止子之间 整合有目的基因的成纤维细胞 不能 胃蛋白酶的最适pH为1.5左右，在接近中性的环境中胃蛋白酶基本没有活性 电刺激 维生素、激素、氨基酸、核苷酸、动物血清、葡萄糖

【解析】

根据图中能分泌人凝血因子Ⅸ医用蛋白的二倍体转基因绵羊的培育流程分析，①为目的基因（人凝血因子Ⅸ基因）构建的基因表达载体，②为鉴定筛选含目的基因的成纤维细胞，③为含目的基因的细胞（核）与去核卵细胞形成重组细胞，④表示利用早期胚胎培养技术培养重组胚胎，⑤是通过胚胎移植技术完成对早期胚胎的移植。

（1）图中①过程为基因表达载体的构建，要使目的基因在转基因绵羊的乳腺细胞中成功表达，需将人凝血因子Ⅸ基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，且使目的基因处于启动子和终止子之间。

（2）重组细胞的细胞核来自整合有目的基因的成纤维细胞。胃蛋白酶的最适pH为1.5左右，在接近中性的环境中胃蛋白酶基本没有活性，所以不能用胃蛋白酶处理绵羊组织块。

（3）电刺激可以促使供体细胞的细胞核进入去核的卵母细胞中。

（4）图中④过程是早期胚胎的培养过程，所用培养液除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸、葡萄糖和动物血清等。