Question

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤，其中的核心步骤是

 

；
（2）若要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的

 

中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的

 

上．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有

 

，具体过程是在

 

和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过

 

产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株．
（3）在哺乳动物的核转移实验中，通过一定的措施将受体细胞激活，使其进行细胞分裂和发育，当胚胎发育到

 

阶段时，将胚胎移入受体（代孕）动物体内．
（4）生态工程是实现循环经济最重要的手段之一，请写出它遵循的基本原理（至少答两项）：

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞核移植技术,生态工程依据的生态学原理

专题：

分析：1、基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
2、植物组织培育的具体过程为：外植体

脱分化

愈伤组织

再分化

新植体．

解答： 解：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达，其中基因表达载体的构建是核心步骤．
（2）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上．植物组织培养的主要原理是植物细胞具有全能性，具体过程是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞培养在人工配制的培养基上，给予适宜的条件，诱导其经过脱分化产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株．
（3）胚胎移植的最佳时期是桑椹胚或囊胚阶段．
（4）生态工程遵循的基本原理包括：物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理．
故答案为：
（1）基因表达载体的构建
（2）T-DNA     染色体DNA  全能性      无菌      去分化（脱分化）
（3）桑椹胚或囊胚
（4）物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理

点评：本题考查基因工程、细胞工程、胚胎工程和生态工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作步骤及各操作步骤中的相关细节；识记植物组织培育的原理及过程；识记胚胎移植的基本程序；识记生态工程的原理，能结合所学的知识准确答题．