Question

15．动物基因工程最令人兴奋的应用是建立生物反应器来生产重要医药产品．抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种血浆糖蛋白，临床上主要用于血液性疾病的治疗．下图为培育转基因奶牛获得抗凝血酶Ⅲ蛋白的流程图．请回答下列问题：

（1）短时间内大量扩增抗凝血酶Ⅲ蛋白基因经常采用PCR技术．过程①是将抗凝血酶Ⅲ蛋白基因导入受精卵，该过程常用的方法是显微注射法．
（2）过程②包括早期胚胎培养（或“动物细胞培养”） 技术和胚胎移植技术；为获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊，在过程②还可使用胚胎分割技术．
（3）若要检测牛奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ蛋白，可采用抗原-抗体杂交技术．
（4）如果检测发现抗凝血酶Ⅲ蛋白基因被成功导入了受精卵，但却没有检测到抗凝血酶Ⅲ蛋白的存在，那应该考虑分别位于目的基因首端的启动子和末端的终止子没有设计好，应从这方面进一步改善．

Answer 1

分析 1、与自然条件下的DNA复制相比，PCR扩增技术的不同之处在于：需要引物，需要耐高温的热稳定性DNA聚合酶．
2、基因工程的操作步骤中，在导入目的基因之前，需要构建基因表达载体，即将目的基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起．
3、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）利用PCR技术能在体外大量扩增目的基因（抗凝血酶Ⅲ蛋白基因）．过程①是将目的基因导入受体细胞，常用的方法是显微注射法．
（2）过程②包括早期胚胎培养和胚胎移植技术；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此可用胚胎分割技术获得多只与该转基因奶牛遗传物质相同的牛犊．
（3）若要检测目的基因是否表达形成相应的蛋白质可采用抗原-抗体杂交技术．
（4）基因表达载体由启动子、终止子、标记基因和目的基因组成．启动子位于首端，终止子位于尾端．
故答案为：
（1）PCR        显微注射法
（2）早期胚胎培养（或“动物细胞培养”） 胚胎移植    胚胎分割
（3）抗原-抗体杂交  
（4）启动子  终止子

点评 本题考查基因工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记胚胎移植的基本程序和胚胎分割技术的特点，能结合所学的知识准确答题．