Question

2．基因工程的操作步骤：①制备重组DNA分子，②转化受体细胞，③筛选出获得目的基因的受体细胞、培养受体细胞并诱导目的基因的表达，④获取目的基因，正确的操作顺序是（　　）

• A． ③②④①
• B． ②④①③
• C． ④①②③
• D． ③④①②

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：基因工程的基本操作步骤主要包括四步：
1、目的基因的获取，即④；
2、基因表达载体的构建，即①制备重组DNA分子，使目的基因与运载体结合；
3、将目的基因导入受体细胞，即②转化受体细胞；
4、目的基因的检测与表达，即③筛选出获得目的基因的受体细胞、培养受体细胞并诱导目的基因的表达，检测目的基因的表达是否符合特定性状要求．
故选：C．

点评 本题知识点简单，考查基因工程的相关知识，只要考生识记基因工程的概念及操作步骤即可正确答题，属于考纲识记层次的考查．对于此类试题，需要考生掌握牢固的基础知识．