题目内容

8．人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原．其疾苗生产和抗体制备的流程如图：

请据图回答：
（1）过程①需要在逆转录酶酶的作用下进行．
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用的两种工具酶是限制性内切酶（或限制酶）和DNA连接酶．
培养基特殊成分主要作用
次黄嘌呤骨髓瘤细胞不能利用
氨基蝶嘌呤阻断DNA合成
胸腺嘧啶核苷脾细胞可用于合成DNA
（3）过程③进行的是细胞融合和筛选，体现了细胞膜具有一定的流动性（填特性），与植物原生质体融合相比，特有的促融方式是用灭活的仙台病毒促融．筛选过程中，可在培养基中加入表中的成分来实现，其原理是：单纯的骨髓瘤细胞因不能利用次黄嘌呤无法增殖，杂交瘤细胞可以增殖，培养基中能够增殖的细胞即为杂交瘤细胞
（4）过程④的主要目的是通过选择获得X，X是能够产生抗A抗体的杂交瘤细胞．
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行核酸（或基因）序列比较；或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测．

分析 分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中①表示逆转录过程；②是基因表达载体的构建过程；③是细胞融合过程；④是选择培养过程；X为杂交瘤细胞．

解答 解：（1）由以上分可知①是逆转录过程，该过程需要逆转录酶参与．
（2）构建A基因重组载体时，首先需用限制性核酸内切酶切割含有A基因的外源DNA分子和运载体，再用DNA连接酶连接A基因和运载体形成A基因重组载体．
（3）细胞融合体现了细胞膜具有一定的流动性；诱导植物原生质体融合的方法包括物理法（离心、振动、电刺激等）和化学法（聚乙二醇），而诱导动物细胞融合的方法包括物理法（离心、振动、电刺激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒），因此与植物原生质体融合相比，特有的促融方式是用灭活的仙台病毒促融．单纯的骨髓瘤细胞因不能利用次黄嘌呤无法增殖，杂交瘤细胞可以增殖，培养基中能够增殖的细胞即为杂交瘤细胞，因此筛选过程中，可在培养基中加入表中的成分来实现．
（4）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，一次是用用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；另一次是用专一抗体检测方法筛选出能产生抗A抗体的杂交瘤细胞．
（5）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或采用抗原-抗体杂交法，即用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测．
故答案为：
（1）逆转录酶
（2）限制性内切酶（或限制酶）和DNA连接酶
（3）一定的流动性    用灭活的仙台病毒促融     单纯的骨髓瘤细胞因不能利用次黄嘌呤无法增殖，杂交瘤细胞可以增殖，培养基中能够增殖的细胞即为杂交瘤细胞
（4）能够产生抗A抗体的杂交瘤细胞
（5）A蛋白核酸（或基因）序列     抗A蛋白的单克隆抗体

点评 本题结合疫苗生产和抗体制备的流程图，考查基因工程、动物细胞融合技术、单克隆抗体等知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，识记单克隆抗体的制备过程，能准确判断图中各过程的名称，再结合所学的知识答题．

练习册系列答案
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18．乙肝是由于人体感染乙肝病毒引起的，接种乙肝疫苗可激起机体的特异性免疫应答，显著降低发病率．下列相关叙述正确的是（　　）
A．该疫苗是小分子物质，可被免疫细胞识别
B．初次接种该疫苗后，可刺激机体免疫系统，产生效应T细胞和抗体
C．再次接种该疫苗后，记忆细胞分化成更多的浆细胞并释放淋巴因子
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19．目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示．

（1）构建人工质粒时要有抗性基因，以便于筛选（鉴别目的基因是否导入受体细胞）．
（2）pBR32Z分子中有单个EcoRI限制酶作用位点，EcoR 1只能识别序列一GAATTC一，并只能在G与A之间切割．若在某目的基因的两侧各有1个EcoRI的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端．．
（3）pBR322分子中另有单个的BamHI限制酶作用位点，现将经BamHI处理后的质粒与用另一种限制酶BgIⅡ处理得到的目的基因，通过DNA连接酶作用恢复键，成功的获得了重组质粒．说明限制酶BamHⅠ和限制酶BglⅡ的酶切产物具有相同末端．
（4）为了检测上述重组质粒是否导入原本无ampR和tetR的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果（空圈表示与图二对照无菌落的位置）．与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是既能抗氨苄青霉素，又能抗四环素的pBR322质粒．
16．科学家初步研制出H5N1型禽流感疫苗，投入使用前，以未感染H5N1病毒的一群健康小鸡（随机分为甲、乙两组）为实验动物进行了实验，过程和结果如图：下列相关分析中，错误的是（　　）
A．乙组小鸡全部死亡可能是体内缺乏足够抗H5N1型病毒的抗体
B．乙组小鸡全部死亡可能是体内缺乏控制形成抗H5N1型病毒抗体的基因
C．甲组小鸡存活是注射H5N1型疫苗已使其体内产生足够抗H5N1型病毒的抗体
D．甲组小鸡存活最可能是体液免疫和细胞免疫共同作用的结果
3．“筛选”是生物技术中常用的手段，下列筛选不能成功的是（　　）
A．基因工程中，在培养基中添加特定的抗生素，筛选出导入运载体的微生物
B．在细胞工程中利用双亲细胞的特性可对杂种细胞进行筛选
C．小麦试验田中设置低温条件筛选抗寒小麦品种
D．基因工程中通过对细胞单独培养检测产物确定目的基因是否正确表达
13．某生物兴趣小组利用图1装置（若干个）开展了有关光合作用和细胞呼吸的实验研究，实验开始时打开活塞开关，使水柱液面平齐，关闭活塞开关，一段时间后，测量左侧水柱上升量，获得如1表的实验数据．
                        表一：实验结果
容器植物部位光质温度（℃）左侧水柱变化量（mL.8h-1）
1天竺葵叶红25120
2天竺葵叶黄2515
3紫罗兰叶红2580
4紫罗兰叶黄2510
表二：不同温度下某植物真正光合作用速率和细胞呼吸速率
温度（℃）15202530354045505560
真正光合作用速率23.56.5875.11000
细胞呼吸速率1.522.534.25.153.51.70
请根据以上图表回答下列问题：
（1）表1的探究性实验课题中的自变量是植物的种类和光质．研究不同植物的光合作用，最好选择的容器标号是1和3．
（2）若装置图的烧杯中加入CO2的缓冲液，则表1获得的数据代表的是净光合作用强度（填“真正光合用强度”或“净光合作用强度”）．
（3）利用图示装置测量天竺葵植株的有氧呼吸速率，实验思路是对装置进行遮光处理，烧杯中盛放氢氧化钠溶液（或能吸收CO2的液体），测量单位时间内水柱移动的距离．
（4）根据表2数据分析回答：
①光合作用和呼吸作用都受温度的影响，其中与光合作用有关的酶对较高温度更为敏感．
②温度为40℃条件下，有机物积累量为0，在这个温度条件下植物根尖细胞中产生ATP的场所是细胞质基质、线粒体．
③在答题卷相应坐标系中画出植物在15～60℃范围内的真正光合作用速率的变化曲线．
7．某性别决定方式为XY的动物从出生到成年，雌雄个体在外观上几乎完全一样，仅凭肉眼难以区分性别．在X染色体上的复等位基因BA（灰红色）对B（蓝色）为显性，B对b（巧克力色）为显性．现有一只灰红色个体和一只蓝色个体交配，后代中出现了一只巧克力色的个体．则亲代灰红色、蓝色与子代巧克力色的性别可能分别是（　　）
A．雄性、雌性、雌性B．雌性、雄性、雌性
C．雄性、雌性、雄性D．雄性、雌性、不能确定
4．下列有关刚果红染色法的叙述，不正确的是（　　）
A．刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入
B．刚果红可以在菌落形成后加入
C．刚果红在倒平板时加入，加入的刚果红不需要灭菌
D．在菌落形成后加入刚果红时，刚果红不需要灭菌
5．如图为转基因抗虫植株的培育过程，①一⑤为不同过程．根据所学知识回答下列问题：

（1）A的本质是小型环状DNA，基因工程的运载体除此之外还有噬菌体、动植物病毒．
（2）过程①和过程②需要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶．过程②得到的B中含有标记基目的作用是检测目的基因是否导入受体细胞．
（3）图中过程不涉及碱基互补配对的过程是③，过程④使抗虫基因插入植物体细胞染色体DNA，原因是农杆菌Ti质粒上的T-DNA片段可将目的基因转移到受体细胞染色体的DNA上．检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上可采用DNA分子杂交技术．
（4）过程④、⑤得到转基因抗虫植株的原理是细胞的全能性，此过程除营养物质外还必须向培养基中添加植物激素即生长素和细胞分裂素．

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