Question

18．研究小组用土壤农杆菌与陆地棉叶肉细胞原生质体共同培养获得了转基因陆地棉，过程如下．请回答下列问题．

（1）图a表示从已经消毒的叶片中剪取部分植物组织细胞．图b表示制备原生质体，培养皿中要加纤维素酶和果胶酶，其原因是植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可除去细胞壁．
（2）图c表示用培养基培养原生质体，培养基中加入了适宜浓度的蔗糖，其主要作用是为原生质体提供碳源和能源和调节渗透压维持原生质体的形状．培养一段时间后，将其与土壤农杆菌混合培养，使重组Ti质粒进入原生质体（植物细胞）．重组Ti质粒上T-DNA段携带了目的基因，可以整合到植物细胞的染色体（染色体DNA）上．然后通过离心（图d）的方法，除去多余的土壤农杆菌．
（3）图e表示将原生质体培养成愈伤组织，然后将其转移到含有一定抗生素的培养基中进行培养（图f），抗生素的作用是筛选出含目的基因的植物细胞．
（4）将愈伤组织转移培养基继续培养（图g），同时注意调整植物生长调节剂的种类和含量，其原因是植物生长调节剂的种类和含量会影响愈伤组织的分化．最终获得完整的植株（图h）．

Answer 1

分析 分析题图：图示是通过土壤农杆菌与植物细胞原生质体共培养的方法获得转基因植物的过程．a获取植物细胞；b、为去除细胞壁获取原生质体的过程；c、用游离的培养基培养原生质体；d为土壤农杆菌与植物细胞原生质体共培养；e表示脱分化过程；f表示用选择培养基进行筛选培养；g表示再分化过程；h表示转基因植物幼苗．据此答题．

解答 解：（1）图b表示用纤维素酶和果胶酶两种酶来制备原生质体，原因是植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可除去细胞壁．
（2）图c表示用培养基培养原生质体，培养基中加入了适宜浓度的蔗糖，其主要作用是为原生质体提供碳源和能源和调节渗透压维持原生质体的形状，将其与土壤农杆菌共同培养，使携带目的基因的Ti质粒的T-DNA进入植物细胞，整合到植物细胞的染色体（染色体DNA），然后通过离心的方法，除去多余的土壤农杆菌．
（3）图e表示将原生质体培养成愈伤组织，然后将其转移到含有一定抗生素的培养基中进行培养（图f），抗生素的作用是筛选出含目的基因的植物细胞．
（4）植物生长调节剂的种类和含量会影响愈伤组织的分化，故将愈伤组织转移培养基继续培养（图g），同时注意调整植物生长调节剂的种类和含量
故答案为：
（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶可除去细胞壁
（2）为原生质体提供碳源和能源　　调节渗透压维持原生质体的形状　　原生质体（植物细胞）　T-DNA　　染色体（染色体DNA）
（3）筛选出含目的基因的植物细胞
（4）植物生长调节剂的种类和含量会影响愈伤组织的分化

点评 本题考查基因工程、植物细胞工程，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤；识记植物体细胞杂交和植物组织培养的过程，能准确判断图中各过程的含义，再结合所学的知识答题