题目内容

12．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．回答下列问题：
（1）为统计样品中活菌的数目，常将样品用稀释涂布法接种于培养基表面．运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落．
（2）为了检验该致病菌对于抗生素的敏感性，在该病菌菌落均匀生长的平板的不同位置，分别放置含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片，培养一段时间后，在四个滤纸片周围出现透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，由此推断，该病人目前适合使用的抗生素A．含C的滤纸片周围透明圈比含A的小，说明该病人该致病菌对C的敏感性比对A的弱；若抗生素B的滤纸片周围没有出现透明圈，最可能的原因是长期服用抗生素B导致的结果；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现一个菌落，这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的，也可能是产生了抗生素D的耐药菌，这种变异的特点是随机的、不定向的（普遍性、频率很低等其他答案也可以）（至少列举两个）．
（3）实验中培养基需用高压蒸汽灭菌、接种环用灼烧灭菌、接种过程也在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是防止外来微生物的污染．

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、无菌技术：消毒和灭菌

 消毒灭菌
概念使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象操作空间、某些液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）接种微生物常用稀释涂布平板法和平板划线法，其中稀释涂布平板法能统计样品中活菌的数目；用该方法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目低． 
（2）透明圈由大到小依次是A＞C＞D＞B，可见抗生素A的作用效果最好，因此该病人目前适合使用抗生素A．对抗生素越敏感，形成的透明圈越大，若含C的滤纸片周围透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A的弱；若抗生素B的滤纸片周围没有出现透明圈，最可能的原因是长期服用抗生素B导致的结果；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现一个菌落，这种菌落的出现可能是由于接种过程不严格导致的，也可能是产生了抗生素D的耐药菌，其形成的根本原因是基因突变，其特点是普遍性、随机性、不定向性、低频性等．
（3）实验中培养基需用高压蒸汽灭菌、接种环用灼烧灭菌、接种过程也在酒精灯火焰旁进行，其达到的目的是防止外来微生物的污染．
故答案为：
（1）稀释涂布     当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
（2）A    该致病菌对C的敏感性比对A的弱    长期服用抗生素B       随机的、不定向的
（3）高压蒸汽      防止外来微生物的污染

点评 本题考查微生物分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法；识记无菌技术及实例；识记微生物的计数方法，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案
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