微载体是由天然葡聚糖等组成的颗粒.常用与贴壁生长的细胞培养.又叫做动物细胞围住培养.与其相关的装置和流程图如下.请回答:(1)微载体的直径很小.其培养原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养液中.细胞在其表面附着/贴壁生长.而且操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态.而让细胞与培养液充分接触.这样细胞就可以在载体表面繁殖� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

2．微载体是由天然葡聚糖等组成的颗粒，常用与贴壁生长的细胞培养，又叫做动物细胞围住培养，与其相关的装置和流程图如下，请回答：

（1）微载体的直径很小，其培养原理是将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养液中，细胞在其表面附着（固着）/贴壁生长，而且操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态，而让细胞与培养液充分接触，这样细胞就可以在载体表面繁殖成单层（“单层”、“多层”）
（2）培养罐中培养细胞时，要注意保持适宜的温度和pH，还需要提供细胞所需的营养、气体环境等．为维持培养液的pH，应在培养液中加入95%空气和5%CO₂的混合气体．图3是某科研小组培养的细胞，由于培养用具灭菌不严格，结果出现曲线2的情况，为了避免这种情况通常可以在培养液中加入抗生素，其作用是防止培养过程中的污染（防止杂菌污染）．
（3）在生产单克隆抗体的过程中，杂交瘤细胞在加入培养罐前，需筛选出符合条件的细胞群，还要对选出的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测方能加入培养罐培养．
（4）科研人员利用明胶微载体培养出了胚胎干细胞，并在培养液中加入分化诱导因子，成功构建了骨组织．
（5）在试管动物的培育中，涉及的关键技术是体外受精和早期胚胎的培养，再将一些胚胎进行移植，就可以实现良种动物的大量繁殖．移植中要求受体母牛要具有健康的体质和正常繁殖的能力．

分析 1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养．
2、动物细胞培养需要满足以下条件
①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理．通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染．此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害．
②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等．通常需加入血清、血浆等天然成分．
③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．
④气体环境：95%空气+5%CO₂．O₂是细胞代谢所必需的，CO₂的主要作用是维持培养液的pH．
3、单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞．利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞．最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体．
4、试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术．

解答解：（1）在动物细胞培养过程中，细胞会出现贴壁细胞生长现象；到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，会出现细胞的接触抑制现象．将对细胞无害的颗粒-微载体加入到培养液中，细胞会附着在颗粒-微载体上生长，而且操作中需要通过搅动使微载体始终保持悬浮状态，而让细胞与培养液充分接触，这样细胞就可以在载体表面繁殖成单层．
（2）在培养液中添加一定量的抗生素，能防止培养过程中的污染；气体环境主要是提供细胞所需的O₂和CO₂，其中CO₂的作用是维持培养液的pH．
（3）细胞融合是随机的过程，所以需要用选择培养基培养基筛选，目的是选择出杂交瘤细胞．对筛选出的细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可产生特定抗体的杂交瘤细胞．
（4）在ES细胞培养液中加入特定的促进分化的因子可以体外诱导定向形成骨组织．
（5）试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植产生后代的技术．胚胎移植中要求受体母牛要具有健康的体质和正常繁殖的能力．
故答案为：
（1）附着（固着）/贴壁       单层
（2）5%CO₂                    防止培养过程中的污染（防止杂菌污染）
（3）抗体检测
（4）分化诱导
（5）早期胚胎          正常繁殖

点评本题综合考查细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记单克隆抗体制备的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节；识记动物细胞培养的具体过程；识记胚胎移植的基本程序，能结合所学的知识准确答题．

练习册系列答案

	A．	核酶彻底水解后的产物是氨基酸
	B．	核酶与催化底物特异性结合时，有氢键形成
	C．	低温能降低酶活性的原因是其破坏了酶的空间结构
	D．	与不加核酶组相比，加核酶组mRNA降解较快，由此可反映核酶的高效性

16．有关如图所示曲线或图例的叙述正确的是（　　）

	A．	图1为加酶和不加酶条件下所需活化能的比较示意图，则ab段为酶催化反应所降低的活化能
	B．	已知叶面积指数=$\frac{叶片总面积}{土地面积}$，有图2可知，当叶面积指数为9时，对植物生长最有利
	C．	若图3表示减数分裂过程中每条染色体上DNA含量平均值的变化，则BC段对应时期为减Ⅰ的前期、中期
	D．	以上两链都是¹⁴N的DNA分子为模板，以¹⁵N标记的脱氧核苷酸为原料，进行一次DNA分子复制，经离心后，放射性结果为图4中的轻、中比例各占50%

13．

表格中几种成分的关系，不能用下面概念图表示的是（　　）

	①	②	③	④	⑤
A	蛋白质	胞内蛋白	分泌蛋白	神经递质	抗体
B	物质跨膜运输方式	主动运输	被动运输	自由扩散	协助扩散
C	可遗传变异的来源	基因重组	突变	基因突变	染色体变异
D	生态系统的结构	组成成分	营养结构	食物链	食物网

20．图甲为某生态系统的碳循环示意图，图乙为该生态系统的能量流动示意图，请据图分析回答：

（1）写出图甲中所包含的食物网：

．
（2）根据食物网判断，若C灭绝，则D的数量会增多．
（3）碳元素从无机环境进入生物群落的生理过程是光合作用和化能合成作用，它以含碳有机物的形式从D转移到E．
（4）土壤小动物大多属于图甲中的E（用图中字母回答），调查其丰富度常用的方法是取样器取样法．
（5）图乙中的肉食动物包括图甲中的C和D，其中a的含义为未利用的能量．

7．某隐性遗传病表现为交叉遗传特点，一对夫妇中女性为该病患者，男性正常．不考虑变异，下列叙述不正确的是（　　）

	A．	父母双方均为该患病女性提供了致病基因
	B．	这对夫妇的子代中女儿均正常，儿子均患病
	C．	女儿与正常男性婚配，后代中患者均为男性
	D．	儿子与正常女性婚配，后代中不会出现患者

14．2017年1月《自然-通讯》发表的研究成果表明：逆转录病毒可能在5亿年前便已进化从而使得病毒比之前的预想“老”了5倍．有关推测错误的是（　　）

	A．	逆转录病毒是一种RNA病毒，其遗传信息存录在RNA上
	B．	逆转录病毒的遗传物质可直接整合到宿主细胞基因组中
	C．	逆转录病毒在宿主细胞内的翻译过程需3种RNA的参与
	D．	逆转录病毒能够发生不定向的突变为其进化提供原材料

11．某些种类的毒品可以使人产生兴奋和愉悦感，经常吸食会对神经系统造成严重损伤并使人上瘾．如图表示某毒品的作用机理，回答问题：

（1）图示为突触的亚显微结构示意图，受体蛋白存在于突触后膜上．
（2）毒品分子与转运蛋白结合，导致突触间隙神经递质含量增加，最终在大脑皮层产生愉悦感．
（3）吸毒成瘾后，吸毒者需要不断增加剂量才能获得同等愉悦感，据图分析其原因是吸毒导致受体蛋白数量减少，为获得同等愉悦的效果需要更多的神经递质，增加吸食毒品的剂量可以增加神经递质的量．

关于光合作用和细胞呼吸的叙述，错误的是（）

A．光合作用过程中存在ADP与ATP的相互转化

B．人体在剧烈运动时所需的能量由乳酸分解提供

C．病毒核酸的复制需要宿主细胞的细胞呼吸提供能量

D．白天，若将黑藻遮光处理，则黑藻叶绿体中NADPH和NADP+的比值下降

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