Question

继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展．最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中．请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是

 

．
（2）在基因工程中，将目的基因与运载体结合时必须用

 

酶．进行基因转移时，通常要将外源基因转入

 

中，原因是

 

．
（3）通常采用

 

技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组．
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的

 

细胞中特异表达．
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的

 

细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．该技术称为

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,动物细胞核移植技术

专题：

分析：基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答： 解：（1）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法人．
（2）在基因工程中，构建基因表达载体时，需先用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体结合形成重组DNA．由于受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达，因此进行基因转移时，通常要将外源基因转入受精卵（或早期胚胎）中．
（3）检测目的基因是否插入了小鼠的基因组通常采用DNA分子杂交技术．
（4）在研制膀胱生物反应器时，应在目的基因前加膀胱组织特异性表达的启动子，使外源基因在小鼠的膀胱上皮细胞中特异表达．
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的细胞核转入去核的卵细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体，该技术称为核移植（或克隆）．
故答案为：
（1）显微注射      
（2）同种限制酶和DNA连接酶  受精卵（或早期胚胎）    受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达
（3）DNA分子杂交（核酸探针）      
（4）膀胱上皮
（5）细胞核转入去核的卵    核移植（或克隆）

点评：本题以膀胱生物反应器的制备为题材，考查基因工程和核移植的相关知识，要求考生识记基因工程的具体步骤及相关注意事项；识记核移植的概念，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．