Question

18．营养缺陷型菌株就是在人工诱导（或自发突变）下，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏掉，使代谢过程中的某些合成反应不能进行，从而为工业生产积累大量的原料产物．如图是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程，请回答．

（1）过程①的方法为稀释涂布平板法，与基本培养基相比，待测培养皿中特有的成分有氨基酸．
（2）过程②应将印在丝绒布上的菌落先转印至基本培养基上，原因是防止基本培养基中混入特殊的营养成分．
（3）为进一步完成对初检的缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取菌落A（选填“菌落A”或“菌落B”）菌落接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃震荡培养1-2天后，离心，取沉淀用（无菌）生理盐水洗涤菌体3次并制备成菌悬液．
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注约15mL融化并冷却至40-50℃的基本琼脂培养基，冷凝后用记号笔在培养皿的皿底划分五个区域，做好标记．
③在划分的五个区域上放入少量分组的氨基酸结晶或粉末（五组混合氨基酸如表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型．

组别	所含氨基酸
A	组氨酸	苏氨酸	谷氨酸	天冬氨酸	亮氨酸
B	精氨酸	苏氨酸	赖氨酸	甲硫氨酸	苯丙氨酸
C	酪氨酸	谷氨酸	赖氨酸	色氨酸	丙氨酸
D	甘氨酸	天冬氨酸	甲硫氨酸	色氨酸	丝氨酸
E	胱氨酸	亮氨酸	苯丙氨酸	丙氨酸	丝氨酸

在上述鉴定实验中，发现在培养基的A、D区域出现生长圈，则说明该缺陷型属于天冬氨酸缺陷型．

Answer 1

分析 分析图解：图中首先利用稀释涂布平板法分离细菌，然后运用“影印法”将菌种接种到两种培养基中：基本培养基、完全培养基，则在基本培养基中，氨基酸缺陷型菌株不能生长，而在完全培养基中能够生长，因此可以选择出氨基酸缺陷型菌株．

解答 解：（1）分析图解可知，过程①导致菌落均匀分布，因此该方法为稀释涂布平板法；两种培养基分别培养是为了筛选出氨基酸缺陷型菌株，因此与基本培养基相比，待测培养皿中特有的成分有氨基酸．类似于完全培养基．
（2）过程②应将印在丝绒布上的菌落先转印至基本培养基上，原因是防止基本培养基中混入特殊的营养成分．
（3）①比较基本培养基和完全培养基中的菌落可知，菌落A为氨基酸缺陷型菌株，因此需要用接种针挑取菌落A接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃震荡培养1-2天后，离心，取沉淀用（无菌）生理盐水洗涤菌体3次并制备成菌悬液．
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注约15mL融化并冷却至40-50℃的基本琼脂培养基，冷凝后用记号笔在培养皿的皿底划分五个区域，做好标记．
③根据题意可知，在培养基的A、D区域出现生长圈，说明A和D两种培养基中存在缺陷的氨基酸，因此比较其相同点，说明该缺陷型属于天冬氨酸缺陷型．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法   氨基酸
（2）基本   防止基本培养基中混入特殊的营养成分
（3）①菌落A   （无菌）生理盐水
②40-50℃皿底
③天冬氨酸缺陷型

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够根据题干信息确定该菌种的筛选过程，同时能够根据表格信息确实能够缺陷的氨基酸种类，意在考查考生的信息处理能力．