从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．(1)不同微生物的生存环境不同.获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样.然后再按一定的方法分离.纯化．培养嗜盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集．(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物生长的特定环境条件.使其数量大大增加.从� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

18．从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定．
（1）不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化．培养嗜盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集．
（2）富集培养指创设仅适合待分离微生物生长的特定环境条件，使其数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法．对降解苯酚的微生物的富集培养应选择以苯酚为唯一碳源的培养基．
（3）如图为分离纯化降解苯酚细菌的部分操作步骤．请回答下列问题：

培养基常用灭菌方法是在温度为121℃条件下，维持15-30min．①是制备培养基时倒平板中的主要操作．完成步骤④的操作，接种共需要6次的灼烧处理．划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始．
（4）培养一段时间后，在培养基表面形成多个单菌落，不同菌株降解苯酚能力有差异，需要做降解能力的性能测定，为选出降解能力强的菌株，具体思路是：用苯酚含量相同的培养液分别培养各菌株，培养相同时间后测定培养液中苯酸含量．
（5）获得分解能力强的菌种后，为了临时保存菌种，把菌种接种在试管的固体斜面培养基上，在合适温度下培养，等菌落长成后，再放入4℃冰箱保藏．

分析 1、培养基按功能分：

种类	制备方法	特征	用途
选择培养基	培养基中加入某种化学成分	根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率	加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基	加入某种试剂或化学药品	依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计	鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌

2、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

3、菌种保存

	临时保存法	甘油管藏法
适用对象	频繁使用的菌种	长期保存的菌种
培养及类型	固体斜面培养基	液体培养基
温度	4℃	-20℃
方法	菌落长成后于冰箱中保存，每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上	将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混合均匀后于冷冻箱内保存
缺点	菌种易被污染或产生变异	\\

解答解：（1）噬盐菌的菌样应从高盐环境采集，如高盐海滩等．
（2）目的微生物能够产生降解苯酚，说明其碳源是苯酚，筛选菌株时应选择以苯酚为唯一碳源的培养基．
（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法，该灭菌方法是在温度为121℃条件下，维持15-30min；①是制备培养基时倒平板中的主要操作；平板划线时，每次划线前都要进行灼烧，最后一次划线结束也要进行灼烧，因此完成步骤④的操作共需要6次的灼烧处理；划线的某个平板经培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落．造成划线无菌落可能的操作失误有接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始．
（4）选出降解能力强的菌株的方法：用苯酚含量相同的培养液分别培养各菌株，培养相同时间后测定培养液中苯酸含量．
（5）临时保存菌种时要把菌种接种在试管的固体斜面培养基上，在合适温度下培养，等菌落长成后，再放入4℃冰箱保藏．
故答案为：
（1）海滩等高盐
（2）以苯酚为唯一碳源
（3）121 倒平板 6 接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始
（4）用苯酚含量相同的培养液分别培养各菌株，培养相同时间后测定培养液中苯酸含量
（5）固体斜面

点评本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及功能；识记无菌技术及实例；识记保藏菌种的两种方法；掌握平板划线法接种时需要注意的细节问题，能结合图中信息准确答题．

练习册系列答案

相关题目

	A．	人的红细胞在呼吸作用过程中，消耗葡萄糖，产物是CO₂、H₂O和 ATP
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	D．	噬菌体能利用自身的核糖体和内质网合成自身的蛋白质

10．绿色荧光蛋白（GFP）会发出绿色荧光，该蛋白质在生物工程中有着广阔的应用前景．请据图回答相关问题：

（1）形成重组质粒时，如果限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC一，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是一↓GATC一．在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因两侧各有一个酶Ⅱ的切点．在DNA连接酶和上述两种不同限制酶的作用下，能否将质粒和目的基因连接起来？可以连接理由是由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同（可互补）．
（2）构建重组质粒时，限制酶切点应位于启动子和终止子之间，保证绿色荧光蛋白基因的正常表达．写出该基因表达过程包含的信息传递图解：

．
（3）在②过程进行转基因体细胞的筛选时的方法是转基因细胞发出绿色荧光．
（4）在核移植过程中，乙兔提供的细胞应是减数第二次分裂中期（次级）卵母细胞．
（5）通过推测氨基酸排序，可以找到对应脱氧核苷酸序列，造出能吸收、发出不同颜色光的荧光蛋白，并能让它们发光更久、更强烈．

6．如图中，横轴表示细胞周期，纵轴表示一个细胞中的染色体或核内DNA分子的数目，请据图回答：

（1）表示有丝分裂细胞中染色体数目变化的是图B，DNA分子数目变化的是图A．
（2）表示减数分裂细胞中染色体数目变化的是图D，DNA分子数目变化的是图C．
（3）图中a-b数目变化的原因是着丝点分裂．c-d数目变化的原因是细胞分裂．

13．某学习小组根据“培养液中酵母菌种群数量的变化”实验，利用不同浓度的葡萄糖溶液培养酵母菌，结果如图所示请分析回答：

（1）估算培养液中酵母菌的总数可以采用抽样检测法，吸出培养液计数之前，将盛培养液的试管轻轻振荡几次，目的是使酵母菌分布均匀，便于估算．
（2）酵母菌在不同浓度的葡萄糖溶液中，种群增长速率的变化都是先增大后减小；图中10%浓度的培养液中种群的K值最大．
（3）酿酒和做面包都需要酵母菌，当酵母菌数量为$\frac{K}{2}$时，最适宜分离获得菌种；K值之后，种群数量减少的原因主要是代谢产物的积累导致酵母菌繁殖受影响（或答“营养物质的消耗”或“pH改变”）．

3．玉米是常见的遗传实验材料．图一为玉米的传粉示意图，图二是不同的传粉方式．

（1）图一玉米的传粉方式是异花传粉（填“自花传粉”、“异花传粉”或“自花传粉和异花传粉”），若在传粉时节正好遇上连续阴雨的天气，为了提高产量，可以采用人工授粉（填“喷洒适宜浓度生长素处理”或“人工授粉”）的方法．
（2）图二是针对相对性状非甜和甜的三种不同的杂交方式，能够区分显隐性的是C．
（3）玉米籽的一对相对性状饱满（A）对皱缩（a）是显性，基因型Aa的玉米，因基因A所在染色体部分缺失导致含A的卵细胞只能与含a的精子结合成合子，则该玉米植株自交后代中基因a的频率为$\frac{2}{3}$．
（4）玉米叶片叶绿素的合成受其7号染色体上一对等位基因（A、a）的控制，同时也受光照的影响．在玉米植株中，体细胞含2个A的植株叶片呈深绿色，含一个A的植株叶片呈浅绿色；体细胞没有A的植株叶片呈黄色，会在幼苗期后死亡．
①现有一浅绿色突变体成熟植株甲，其体细胞（如图三）中一条7号染色体的片段m发生缺失，记为q；另一条正常的7号染色体记为p．片段m缺失的花粉会失去受精活力，且胚囊中卵细胞若无A或a基因则不能完成受精作用．有人推测植株甲的A或a基因不会在片段m上，他的推测正确（填“正确”或“不正确”），原因是因A或a基因在m段，不可能出现浅绿色．
②为了进一步稳定上述植株甲的基因A、a在染色体p、q上的分布，现将植株甲进行自交得到F₁，待F₁长成成熟植株后，观察并统计F₁表现型及比例．
请预测结果并得出结论：
Ⅰ、若F₁全为浅绿色植株，则植株甲中A位于q上，a位于p上．
Ⅱ、若_F1深绿：浅绿=1：1，则植株甲体细胞中基因A位于p上，基因a位于q上．

10．如图是某森林在遭受火灾完全烧毁前后植被的分布及变化情况，下列叙述正确的是（　　）

	A．	a〜b段，三类植物呈斑块镶嵌分布属于水平结构
	B．	b〜d段，由于森林完全烧毁发生的演替属于初生演替
	C．	群落演替过程中，生产者固定的太阳能总量一直增加
	D．	b〜d段群落演替的过程中群落的优势种没有发生变化

从成分、功能方面将细胞器进行归类，不合理的是（）

A．能产生水的细胞器有线粒体、核糖体等

B．可以产生ATP的细胞器是线粒体和叶绿体

C．可能含有色素的细胞器有叶绿体和液泡

D．含有RNA的细胞器只有线粒体、叶绿体

艾滋病的主要传播媒介是（）

A．血液和精液 B．握手和拥抱

C．衣物和卧具 D．空气和食物

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