Question

14．酸奶是牛奶经过乳酸菌（主要是保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌）发酵制成的．乳酸菌可将牛奶中的乳糖转化为乳酸，从而减轻某些人群的乳糖不耐受症状．请回答问题：
（1）为鉴别市售酸奶中的菌种，应该采用平板划线法或稀释涂布平板法法，在固体培养基上进行接种，观察所获单菌落的特征．还要对菌落中的菌种进行涂片，并用显微镜进行进一步的观察和鉴定．
（2）实验前需要进行灭菌的是ab．
a．培养基   b．培养皿  c．恒温培养箱  d．实验者的双手  e．酸奶
（3）某同学在配制平板时加入CaCO₃，从而成功筛选出高效产生乳酸的菌株，其筛选依据的原理是乳酸会与CaCO₃反应形成透明圈，透明圈直径越大，产生乳酸能力越强．
（4）抗生素在现代畜牧业中的广泛应用，不可避免地造成牛奶中抗生素残留．若长期饮用含有抗生素的牛奶，会对人体健康造成危害．利用嗜热链球菌对抗生素的高敏感性，该生进行了如下实验：
将灭菌的滤纸圆片（直径8mm），分别浸润在不同处理的牛奶中一段时间后，放置在涂布了嗜热链球菌的平板上（如图），在37℃下培养24h，测量结果如表：

组别	牛奶处理方法	抑菌圈宽度（mm）
1	含抗生素消毒鲜牛奶	4.5
2	不含抗生素消毒鲜牛奶	0
3	含抗生素鲜牛奶	4.6
4	不含抗生素鲜牛奶	0
5	待测奶样	5.8

注：消毒方法为80℃水浴加热5min，然后冷却至37℃以下
通过3、4组实验可得出的结论为抗生素能够杀死嗜热链球菌，形成抑菌圈；通过1、3组实验可得出的结论为80℃水浴加热5min的消毒方法不会使牛奶中的抗生素减少或消除；第5组的实验结果表明，此待测奶样是否适合用于制作酸奶？不适用．

Answer 1

分析 1．无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）微生物常见的接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法法，鉴别培养基中，一般需要加入琼脂作为凝固剂制成固体培养基，然后观察所获单菌落的特征．还要对菌落中的菌种进行涂片，并用显微镜进行进一步的观察和鉴定．
（2）实验前需要进行灭菌的有培养基和培养皿，恒温培养箱、实验者的双手以及酸奶需要需要进行消毒．
（3）某同学在配制平板时加入CaCO₃，从而成功筛选出高效产生乳酸的菌株，其筛选依据的原理是乳酸会与CaCO₃反应形成透明圈，透明圈直径越大，产生乳酸能力越强．
（4）分析表格可知，3、4组实验的自变量为鲜牛奶中是否含有抗生素，通过3、4组实验可得出的结论为抗生素能够杀死嗜热链球菌，形成抑菌圈；1、3组实验实验的自变量为是否经过消毒处理，并且消毒方法为80℃水浴加热5min，然后冷却至37℃以下，因此通过1、3组实验可得出的结论为80℃水浴加热5min的消毒方法不会使牛奶中的抗生素减少或消除；第5组的实验结果表明，此待测奶样不适合用于制作酸奶．
故答案为：
（1）稀释涂布平板法   固体    显微镜
（2）a b
（3）乳酸会与CaCO₃反应形成透明圈，透明圈直径越大，产生乳酸能力越强．
（4）抗生素能够杀死嗜热链球菌，形成抑菌圈80℃水浴加热5 min的消毒方法不会使牛奶中的抗生素减少或消除不适用

点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够掌握微生物分离与纯化的方法，识记培养基的类型、特点及用途，掌握消毒和灭菌的区别以及使用范围等，再结合表格数据得出正确的实验结论．