Question

6．人血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值．如图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径．

（1）如果HSA基因序列未知，可以采用从基因文库中提取的方法获取该目的基因，为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建重组DNA后才能导入宿主细胞．
（2）方框中的“？”一般选用的生物是农杆菌，为了提高II过程的导入成功率，通常用氯化钙处理大肠杆菌．
（3）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以，选择I途径（填I或II）获取rHSA更有优势．
（4）为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA，可以用C方法来进行检验．
A．检验HSA基因是否导入          B．检验细胞中是否产生相应的mRNA
C．抗原、抗体杂交                D．检测是否有标记基因．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）获取目的基因的方法有：从基因文库中获取、采用PCR技术扩增（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况下）、人工化学合成（适用于目的基因较小且序列已知的情况下）．因此如果HSA基因序列未知，可以采用从基因文库中提取 的方法获取该目的基因；为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建基因表达载体（重组DNA）后才能导入宿主细胞．
（2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，因此方框中的“？”一般选用的生物是农杆菌；将目的基因导入微生物细胞时常有感受态细胞法，即用氯化钙处理微生物细胞，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（3）由于大肠杆菌是原核生物，其细胞中不含内质网和高尔基体，而人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以，选择I途径获取rHSA更有优势．
（4）检测目的基因是否表达形成蛋白质可以采用抗原-抗体杂交法．
故答案为：
（1）从基因文库中提取    重组DNA     
（2）农杆菌      氯化钙
（3）I        
（4）C

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．