题目内容
(1)实验材料用具：大麦种子、0.1%淀粉溶液、浓度分别为2×10-5mol/L、2×10-6mol/L、2×10-7mol/L、2×l0-8mol/L的赤霉素溶液、醋酸缓冲液(用以稳定酶的活性)、I2-KI溶液、刀片、青霉素小瓶、分光光度计。
(2)实验步骤
①．选取大小及发育状况一致、健康的大麦种子50粒，用刀片将每粒种子横切成两半，使其切成无胚的半粒和有胚的半粒(如下图)，分别置于新配制的次氯酸钠溶液中浸泡15min，取出用无菌水冲洗数次，备用。
(3)上述试验中，将材料置于次氯酸钠溶液中浸泡15min，然后取出用无菌水冲洗数次的目的是________。如果1号小瓶为空白对照组，则实验材料加_______，3～6号小瓶实验材料加__________。用分光光度计测定各组溶液的吸光度，比较吸光度的差异，实际上是测_______来衡量α-淀粉酶的活性。
萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高，主要有α－淀粉酶和β－淀粉酶。α－淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6、0℃下可迅速失活，而β－淀粉酶耐酸、不耐热，在70℃条件下15 min后失活。根据它们的这种特性，可分别测定一种酶的催化效率。某实验小组进行了“提取小麦种子中α－淀粉酶并测定α－淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”等相关实验。
实验材料：萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。
主要试剂及仪器：1 mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。
实验步骤：
步骤一：制备酶溶液。
步骤二：略。
步骤三：取6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号，按下表要求加入试剂，再观察各试管内的颜色变化(＋表示碘液变蓝色，－表示碘液不变色)。
| 试管编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| 5%的可溶性淀粉溶液(mL) | 8 | 8 | 8 | 8 | 8 | 8 |
| 恒温水浴5 min(℃) | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
| α－淀粉酶保持活性而β－淀粉酶失去活性的溶液(mL) | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 |
| 溶液混合，振荡后恒温水浴5 min(℃) | 0 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
| 加入碘液，振荡后观察颜色变化 | ＋＋＋ | ＋＋ | ＋ | － | ＋＋ | ＋＋＋ |
请回答下列问题：
(1)资料表明：小麦种子发芽时，胚产生赤霉素，赤霉素扩散到糊粉层，诱导淀粉酶的合成。赤霉素诱导淀粉酶合成的主要机理是__________________________。选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是________________________________________________。
(2)步骤二的具体操作是____________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)加入碘液，振荡后观察颜色变化，发现试管4中碘液不变色，能否据此推断α－淀粉酶的最适温度一定是60℃？________。理由是_____________________________________
________________________________________________________________________。
该实验中不能选用斐林试剂检测实验结果的主要原因是
________________________________________________________________________。
(4)若要进一步研究小麦种子中β－淀粉酶的最适温度，则需获得β－淀粉酶保持活性而α－淀粉酶失活的酶溶液。请简要写出制备该种酶溶液的方法：______________________
________________________________________________________________________。
（7分）萌发的禾谷类种子中淀粉酶的含量显著增高，主要有α－淀粉酶和β－淀粉酶。α－淀粉酶不耐酸、较耐热，在pH为3.6、0℃下可迅速失活，而β－淀粉酶耐酸、不耐热，在70℃条件下15min后失活。根据它们的这种特性，可分别测定一种酶的催化效率。某实验小组进行了“提取小麦种子中α－淀粉酶并测定α－淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”等相关实验。
实验材料：萌发3天的小麦种子（芽长约1cm）。
主要试剂及仪器：1mg/mL的标准麦芽糖溶液、5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。
实验步骤：
步骤一：制备酶溶液。
步骤二：略。
步骤三：取 6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号，按下表要求加入试剂，再观察各试管内的颜色变化（注：+表示碘液变蓝色，-表示碘液不变色）。
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试管编号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|
5％的可溶性淀粉溶液（mL） |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
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恒温水浴5min（℃） |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
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α－淀粉酶保持活性而β－淀粉酶失去活性的溶液 (mL) |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
1 |
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恒温水浴5min（℃） |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
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溶液混合，振荡后恒温水浴5min（℃） |
0 |
20 |
40 |
60 |
80 |
100 |
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加入碘液，振荡后观察颜色变化 |
+++ |
++ |
+ |
- |
++ |
+++ |
请回答下列问题：
（1）资料表明：小麦种子发芽时，胚产生赤霉素，赤霉素扩散到糊粉层，诱导淀粉酶的合成。赤霉素诱导淀粉酶合成的主要机理是 。选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是 。
（2）步骤二的具体操作是 。
（3）加入碘液，振荡后观察颜色变化，发现试管4中碘液不变色，能否据此推断α－淀粉酶的最适合温度一定是60℃？ 。理由是 。该实验中不能选用斐林试剂检测实验结果的主要原因是 。
（4）若要进一步研究小麦种子中β－淀粉酶的最适温度，则需获得β－淀粉酶保持活性而α－淀粉酶失活的酶溶液。请简要写出制备该种酶溶液的方法： 。