题目内容

14．自养需氧型的硝化细菌能够降低水体中的铵盐，对水体有一定的净化作用，请回答：
（1）培养硝化细菌时，将含固体培养基的培养皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培养基（或防止培养基表面的水分过快挥发）．培养基中加入铵盐为硝化细菌的生长提供氮源（或氮源和能量），培养基中没有加入有机碳，从功能上看这种培养基属于选择培养基．
（2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水．样液稀释103倍后，取0.1mL涂布到四个平板，统计其菌落数分别为251、265、276、348个，可推测原样液中硝化细菌的浓度为2.64×106个/mL，该方法测定的硝化细菌的含量和实际值相比，一般偏小（填“偏大”或“偏小”）．
（3）若要探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小，现提供足量含某铵盐的液体培养基及PH值分别为5、9的弱酸和弱碱缓冲液，写出你的实验设计思路：将含胺盐的液体培养基均分成三等份，分别加入等量的弱酸、弱碱缓冲液和无菌水（作为对照）使其PH值依次调节为5、9、7，培养相同时间后，测定培养基中的胺盐的剩余量来判断硝化细菌对铵盐转换能力的大小．

分析 1、培养基按功能分：

种类制备方法特征用途
选择培养基培养基中加入某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
其中，稀释涂布平板法可用于计数活菌的数目．

解答 解：（1）微生物培养中将含有固体培养基的培养皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培养基．硝化细菌能够利用铵盐氧化时释放的能量，同时铵盐也可以为硝化细菌提供氮源．硝化细菌属于自养微生物，培养基中不需要进入碳源，从功能上看这种培养基属于选择培养基．
（2）硝化细菌纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水．样液稀释103倍后，取0.1mL涂布到四个平板，统计其菌落数分别为251、265、276、348个，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，则可推测原样液中硝化细菌的浓度为$\frac{251+265+276}{3}$×103×$\frac{1}{0.1}$=2.64×106个/mL；由于两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的是一个菌落，因此该方法测定的硝化细菌的含量和实际值相比，一般偏小．
（3）探究弱酸弱碱条件下硝化细菌对铵盐转化能力的大小，需要设置酸性、中性、碱性三组进行相互对照，所以取含铵盐的液体培养基均分成3等分，其pH值可依次调节为5、7、9（或6、7、8），培养相同的时间后，可通过测定培养基中的铵盐的剩余量来判断硝化细菌分解能力的大小．
故答案为：
（1）防止冷凝形成水滴污染培养基（或防止培养基表面的水分过快挥发）    氮源（或氮源和能量）     选择
（2）无菌水     2.64×106     偏小
（3）将含胺盐的液体培养基均分成三等份，分别加入等量的弱酸、弱碱缓冲液和无菌水（作为对照）使其PH值依次调节为5、9、7，培养相同时间后，测定培养基中的胺盐的剩余量来判断硝化细菌对铵盐转换能力的大小

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够掌握无菌技术的主要内容，掌握选择培养基的选择作用，并具有一定的实验设计能力，难度适中．

练习册系列答案
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