题目内容
请分析下面一项专利。
| 申请专利号 | 03109739.1 | 时间 | 2003.04.14 |
| 名 称 | 利用转基因番茄生产胰岛素的方法 | 公开号 | 1458161 |
| 公开日 | 2003.11.26 | 申请（专利权） | 林忠平 |
| 地 址 | 北京市北京大学 生命科学学院 | 发明（设计人） | 林忠平、倪挺、 陈溪、胡鸢雷 |
| 专 利 摘 要 | 本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下，通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。 | ||
⑴此基因工程中，目的基因是 。将人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的工具酶是 。
⑵试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列的原因：
。
⑶用目的基因与农杆菌的 结合构建表达载体。目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是 ，检测受体细胞中是否存在目的基因可采用 技术。
⑴ 人胰岛素基因（2分）限制（性核酸内切）酶、DNA连接酶（2分） ⑵ 使胰岛素合成后在植物内质网中保存，以免在细胞内被降解（2分） ⑶ 质粒（或Ti质粒）（3分） 番茄染色体DNA上是否插入了目的基因（3分） DNA分子杂交（3分）
名校课堂系列答案
请分析下面一项专利。
| 申请专利号 | 03109739.1 | 时间 | 2003.04.14 |
| 名称 | 利用转基因番茄生产胰岛素的方法 | 公开号 | 1458161 |
| 公开日 | 2003.11.26 | 申请（专利权） | 林忠平 |
| 地址 | 北京市北京大学 生命科学学院 | 发明（设计人） | 林忠平、倪挺、 陈溪、胡鸢雷 |
| 专利 摘要 | 本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下，通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。 | ||
⑵试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列的原因：
。
⑶用目的基因与农杆菌的 结合构建表达载体。目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是 ，检测受体细胞中是否存在目的基因可采用 技术。
请分析下面一项专利。
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申请专利号 |
03109739.1 |
时间 |
2003.04.14 |
|
名 称 |
利用转基因番茄生产胰岛素的方法 |
公开号 |
1458161 |
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公开日 |
2003.11.26 |
申请（专利权） |
林忠平 |
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地 址 |
北京市北京大学 生命科学学院 |
发明（设计人） |
林忠平、倪挺、 陈溪、胡鸢雷 |
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专 利 摘 要 |
本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下，通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。 |
⑴此基因工程中，目的基因是 。将人工合成的DNA片段拼接在一起，所必需的工具酶是 。
⑵试分析在C端加上KDEL的内质网滞留序列的原因：
。
⑶用目的基因与农杆菌的 结合构建表达载体。目的基因能否在番茄中稳定遗传的关键是 ，检测受体细胞中是否存在目的基因可采用 技术。
３５. 回答有关“基因工程”方面的问题（共10分）
I．请分析下面一项专利：
| 申请专利号 | 03109739.1 | 专利申请日 | 2003.04.14 |
| 名称 | 利用转基因番茄生产胰岛素的方法 | 公开号 | 1458161 |
| 公开日 | 2003.11.26[ | 申请（专利权） | 林忠平 |
| 地址 | 北京市北京大学生命科学学院 | 发明（设计）人 | 林忠平、倪挻、陈溪、胡雷 |
| 专利摘要 | 本发明利用转基因番茄作为生物反应器生产人胰岛素。所用的人胰岛素基因是依据植物偏爱密码子的原则来设计所含的密码子，通过人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的内质网滞留序列，避免胰岛素在植物细胞中的降解。将该基因置于CaMV35S启动子和果实专一性启动子2A12的驱动之下通过农杆菌介导的方法转入番茄中，在番茄的果实中表达人胰岛素。 | ||
（１）此基因工程中，目的基因是 。检测受体细胞中是否存在目的基因，方法有 。这项专利所依据的遗传学原理主要是 。
（２）重组时，在C端加上KDEL的内质网滞留序列的目的是 。
（３）为了防止目的基因通过花粉转移到其他植物，应该把目的基因导入受体细胞的
中。
II．下图描述的是上述利用转基因番茄获得产品的过程。已知限制酶a的识别序列和切点是—G↓GATCC— ，限制酶b的识别序列和切点是—↓GATC—。
（１）图中①的过程是______过程。
（２）图中②的过程，在基因工程中的步骤是________________。
（３）目的基因与农杆菌质粒重组过程中，对符合设计要求的质粒进行酶切。请画出农杆菌质粒被限制酶a切割后所形成的两个DNA片段末端碱基序列______________。
（４）目的基因导入细胞后要成功表达，需经历______和______两个过程。