题目内容
4．屠呦呦获得诺贝尔生理学奖后，最新研究表明，青蒿素还可用于糖尿病的治疗．研究人员利用基因工程培育出高产的转基因青蒿．（1）青蒿的cDNA文库，是以从青蒿细胞中提取的mRNA为模板，通过反转录（方法）建立，该文库中的基因不含有（填“含有”或“不含有”）启动子．
（2）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建．若选择的限制酶切出的DNA片段是平末端，应选择T4DNA连接酶进行连接．
（3）目的基因的大量扩增可以采用PCR技术，该技术的原理是DNA（双链）复制，该技术中需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）．
分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
解答 解：（1）cDNA文库是以mRNA为模板，通过反转录法建立的；由于启动子和终止子不能转录形成mRNA，因此以mRNA为模板逆转录形成的cDNA中不含有启动子、终止子等结构．
（2）基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建；根据酶的来源不同，DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶、T4DNA连接酶，这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低．
（3）PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其原理是DNA复制．PCR在较高温度下进行，因此该技术中需使用一种特殊的酶是热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）．
故答案为：
（1）mRNA 反转录 不含有
（2）基因表达载体的构建 T4DNA连接酶
（3）PCR DNA（双链）复制 热稳定的DNA聚合酶（Taq酶）
点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作工具及操作步骤等，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．
口算能手系列答案
| A． | 用尿液反复浸过的黄泥封裹树枝，促进树枝生根．其原理是生长素促进枝条生根 | |
| B． | 玉米即将成熟时，若经历干热后又遇大雨，种子易在穗上发芽．其原因是高温降解玉米产生的脱落酸，解除了种子休眠，种子吸水萌发 | |
| C． | 将成熟木瓜与未成熟柿子一起放置，促进柿子成熟．其原理是乙烯促进果实发育 | |
| D． | 植物的生命活动受到多种植物激素的调节，例如生长素能促进植物生长，其作用原理是促进植物细胞的伸长 |
| A． | 基因突变的方向与环境有着明确的因果关系 | |
| B． | 基因在杂交过程中能保持完整性 | |
| C． | DNA分子具有多样性是生物体多样性的物质基础 | |
| D． | 有性生殖的优越性体现在配子的多样性及配子结合的随机性 |
