Question

15．利用小鼠制备抗羊红细胞的单克隆抗体，回答下列有关问题：
（1）取相应B细胞前必需先给小鼠注射羊红细胞，形象地说先“打针”，否则失败．
（2）诱导融合的两种细胞名称及作用：免疫过的B淋巴细胞（浆细胞）--产生抗体；骨髓瘤细胞一一大量增殖．
（3）诱导融合与原生质融合的不同方法：灭活病毒诱导．
（4）两次筛选的目的及方法：
①在特定的选择性培养基上，在该培养基上未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞细胞才能生长．
②经①筛选后的细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，需经克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞．
（5）两种培养提取场所：
①体外培养一一细胞培养液提取．
②体内小鼠腹腔中培养一一小鼠腹水中提取．
（6）优点：特异性强，灵敏度高，并可大量制备．

Answer 1

分析 1、抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体．从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差．
2、单克隆抗体的制备
（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞
（2）获得杂交瘤细胞
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体．
（3）克隆化培养和抗体检测
（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖
（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取

解答 解：（1）取相应B细胞前必需先给小鼠注射羊红细胞，羊红细胞作为抗原，刺激机体产生相应的B细胞．
（2）免疫过的B淋巴细胞（浆细胞）能产生抗体；骨髓瘤细胞具有大量增殖特征．
（3）动物细胞诱导融合与原生质融合的不同方法：灭活病毒诱导．
（4）两次筛选的目的及方法：
①在特定的选择性培养基上，在该培养基上未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞细胞才能生长．
②经①筛选后的细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，需经克隆化培养和抗体检测，经多次筛选后就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞．
（6）单克隆抗体的优点：特异性强，灵敏度高，并可大量制备．
故答案为：
（1）羊红细胞
（2）免疫过的B淋巴细胞（浆细胞）；大量增殖
（3）灭活病毒诱导
（4）①选择性；杂交瘤细胞
②克隆化； 抗体
（6）特异性；灵敏度

点评 本题考查单克隆抗体制备相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，需要学生理解加记忆．