Question

2001年，Schittek等科学家从人体汗液中分离得到一种称作Dermcidin（DCD）的人汗腺抗菌肽，这种物质具有抗细菌、真菌、病毒等的活性，有望成为替代普通抗生素的一类新型药物．研究人员已分离获得了控制DCD合成的基因．请据此回答问题：
（1）为了评估DCD的抗菌性，研究人员用大肠杆菌进行了抗菌实验．分别在未加入DCD的培养基和

 

的培养基中接种

 

．培养一段时间后，比较两种培养基中的

 

，确定该物质的抗菌效果．实验所用培养基为细菌生长提供的主要营养有

 

．在此基础上，培养基还需满足细菌生长对

 

、特殊营养物质以及氧气的要求．
（2）应用PCR技术可以对DCD基因进行体外大量扩增．此过程需在一定的缓冲溶液中进行，反应体系中应提供模板、引物、

 

作为原料以及

 

酶．同时，通过控制

 

条件使DNA复制在体外反复进行．理论上，若要将DCD基因转入其他生物，可将此基因与

 

连接构建形成重组DNA之后导入受体细胞，在此构建过程中需用到的工具酶是

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,用DNA片段进行PCR扩增

专题：

分析：阅读题干可知，本题是通过实验研究DCD的抗菌效果和DCD基因的体外扩增，根据问题涉及的具体内容回忆相关知识，分析综合进行解答．

解答： 解：（1）由题意可知，本题的实验目的是评估DCD的抗菌性，所以实验可分2组，实验组在培养基中甲DCD，对照组的培养基不加DCD，将同种、同浓度的大肠杆菌菌液接种到2个培养基上，放在相同的条件下培养一段时间，比较2个培养基上的菌落数目，判断抗菌效果；在此过程中，培养基为大肠杆菌生长提供了水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，除此之外，培养基还要满足细菌生长对PH、特殊营养物质和氧气的需求．
（2）应用PCR技术可以对DCD基因进行体外大量扩增，反应体系中应提供模板、引物、4种游离的脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶，同时通过控制温度实现DNA的解聚，使DNA复制在体外反复进行，若要将DCD基因转入其他生物，可以通过基因工程技术，让基因与运载体结合，形成重组DNA，导入受体细胞，构建重组DNA的过程所用到的酶的限制性内切酶和DNA连接酶．
故答案应为：
（1）加入DCD   （大肠杆菌）菌液   菌落数目           水、碳源、氮源、无机盐      pH
（2）4种游离的脱氧核苷酸（dNTP）         DNA聚合      温度          （运）载体          限制酶和DNA连接酶

点评：本题的知识点是培养基的成分，PCR技术，主要考查学生设计实验的能力，运用所学的生物学知识解决生活中实际问题的能力．