Question

分析回答下列有关生物技术的问题抗体的制备经历了细胞学层面和分子学层面两个合成途径的研究．如图1是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图．

（1）在获取抗体之前，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次，重复注射的目的是

 

．免疫学称细胞A为

 

，该细胞的免疫作用被称为

 

免疫．
（2）过程①至②获所取的抗体称为

 

，其中Y细胞称为

 

．
（3）③至⑥流程获取抗体的技术称为

 

技术．过程⑤需要限制性内切酶，还需要

 

酶．V1基因体外扩增的技术一般简称为

 

．
用限制酶EcoRV单独切割该普通质粒，可产生14kb（1kb即1000个碱基对）的长链，而同时用限制酶EcoRV、Mbol联合切割同一种质粒，得到三种长度的DNA片段，见图2，其中*表示EcoRV限制酶切割的一个粘性末端．
（4）若Mbol限制酶独立切割该普通质粒，则可以产生的长度为

 

的DNA片段．
（5）EcoRV限制酶切割普通质粒的切割位点如图3，*为切割点．请在答题卡的图上的大致位置上也用箭头标出Mbol限制酶的酶切位点，并标示相应片段长度．
基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤．若图4中箭头表示大肠杆菌质粒的相关基因与限制酶的酶切位点．图5示意有关限制酶在DNA分子中的具体切点．图6表示运用影印培养法（使在一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入大肠杆菌．

限制酶	MseI	PstI	EcoRI	SmaI	XmaI
识别序列及切割位点

（6）培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有

 

、

 

．从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是

 

菌落中的细菌．

Answer 1

考点：单克隆抗体的制备过程,基因工程的应用

专题：

分析：据图1分析，①表示人工合成目的基因；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体受体．
据图2分析：该质粒共有碱基14kb，在质粒上有MboI酶的两个切点，有EcoRV酶的一个切点．
根据图4和图5分析，目的基因导入的位点是抗青霉素基因，说明抗青霉素基因不能表达，而抗四环素基因能表达，细菌在含四环素的培养基能生长，在含青霉素的培养基上不能生长．

解答： 解：（1）向健康人体注射重复注射特定抗原（如乙肝疫苗，增加抗原数量，引起显著免疫反应，抗体是由效应B细胞分泌，参与体液免疫．
（2）效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，即能分泌特异性抗体，又能无限繁殖，进而产生单克隆抗体．
（3）③至⑥流程属于转基因技术，原理是基因工程．过程⑤基因表达载体的构建需要限制性内切酶和DNA连接酶．V1基因体外扩增的技术为（聚合酶链式反应），简称PCR技术，原理是DNA复制．
（4）从题目的已知条件看，该质粒共有碱基14kb，在质粒上有MboI酶的两个切点，有EcoRV酶的一个切点，再根据二者共切后的片段分成情况，即可绘制出在质粒上两种酶的切点．
（5）根据上题切割位点，去除EcoRV酶的一个切点，则Mbol限制酶独立切割普通质粒，则可以产生的长度为8KB与6KB的DNA片段．
（6）培养基A中菌落不变，说明培养基中四环素，使得含有重组质粒和非重组质粒的受体细胞存活，则可能含有目的基因的受体细菌6个；培养基B中菌落4个，则培养基B中含有青霉素，使得重组质粒的受体细胞不能存活，含有目的基因的是2个细菌．
故答案为：（1）、增加抗原数量，引起显著免疫反应    浆细胞（效应B淋巴细胞）        体液
（2）、单克隆抗体                杂交瘤细胞
（3）、转基因技术      DNA连接酶     PCR技术    
（4）、8KB与6KB  
（5）
（6）、四环素   青霉素（青霉素和四环素）   2和6

点评：本题考查单克隆抗体的制备、基因工程等相关知识，意在考查学生图文转换能力，理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能从材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题．