Question

3．完成如图基因工程操作的常规方法概念图：

限制酶、DNA连接酶、目的基因的检测．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：基因工程中，首先需要用限制酶提取目的基因；获得目的基因后，利用限制酶和DNA连接酶将目的基因与运载体结合；构建基因表达载体后，将目的基因导入受体细胞；基因工程操作是否成功需要最后一步，即目的基因的检测与鉴定．
故答案为：限制酶    DNA连接酶    目的基因的检测

点评 本题着重考查了基因工程的操作步骤，属于简单题，考生要能够根据基因工程的操作过程识记四个步骤，属于考纲中识记层次的考查．