Question

8．如图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问题．

（1）选用的材料合适与否是能否成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用单核期的花粉可提高成功率．选择花粉时，一般要通过镜检（或显微镜观察）来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是焙花青-铬矾溶液．
（2）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比．
（3）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度液泡化的薄壁细胞，胚状体与正常受精卵（或受精卵）发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根．
（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌．①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶．①②③⑥（填编号）需要灭菌，④⑤（填编号）需要消毒．
（5）试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应如何壮苗？将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中．

Answer 1

分析 1、分析题图：图示表示月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，其原理是植物细胞具有全能性．脱分化过程需避光培养才能形成愈伤组织，其分化程度低，全能性高；再分化过程需光培养形成胚状体．
2、月季花药离体培养形成的是单倍体植株，对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于单核期，因为单核期，细胞核由中央移向一侧的时期，花药培养成功率最高．3、选择花药时，确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法．某些植物的花粉不易着色需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色．花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30s→无菌水冲洗→吸干表面的水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4min→无菌水再冲洗3～5次．在无菌条件下剥离花药时要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织），同时还要彻底除去花丝．因为花丝的存在不利于愈伤组织或胚状体的形成．实验流程为：材料的选取→材料的消毒→接种和培养→结果分析与评价．

解答 解：（1）对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于单核期，因为单核期，细胞核由中央移向一侧的时期，花药培养成功率最高，而且这个时期对离体刺激敏感，一般要通过镜检（显微镜观察）来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，对于花粉细胞核不容易着色的植物常用的染色剂是焙花青-铬矾溶液．
（2）如图花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比．
（3）愈伤组织是一团没有特定结构进和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞．这种薄壁细胞排列疏松无规则，呈高度液泡化．胚状体类似柸的结构，具有胚芽和胚根在合适的条件下发育成为新的植物．胚是有受精卵发育而来．
（4）物的组织成功的关键在于无菌操作，其中培养基、培养皿、接种环、三角锥形瓶都需要灭菌；花蕾、实验操作者的双手都需要消毒，①②③⑥需灭菌，④⑤需消毒．
（5）将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中
故答案为：
（1）单核　镜检（或显微镜观察）　焙花青-铬矾溶液
（2）激素的种类及其浓度配比
（3）液泡化　  正常受精卵（或受精卵）
（4）①②③⑥④⑤
（5）将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中

点评 本题考查了花药离体培养材料的选择、培养基中激素的作用等相关知识，意在考查考生对于植物组织培养的理解、识记和运用能力，难度中等．