题目内容
【题目】为了调查某河流的水质状况，某生物兴趣小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）实验室常用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养细菌，牛肉膏能提供的主要营养有 ___。一般用____琼脂培养基培养酵母菌。
（2）如图，该小组采用的是 _____________分离水样中的细菌。操作时，接种环通过____灭菌，在第二次及以后的操作时，总是从上一次的末端开始，这样做的目的是 ____。
（3）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是____。除了上述的活菌计数法外， ________________也是测定微生物数量的常用方法。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是： ___________________________________________________________________ 。
【答案】碳源、氮源、磷酸盐和维生素 麦芽汁 平板划线法 灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 当两个或者多个细胞连在一起时平板上观察到的是一个菌落 显微镜直接计数 振荡培养能提高培养液的溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率
【解析】
1.微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
2.划线分离操作中的有关问题：
①在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环。
第一次灼烧 | 每次划线之前灼烧 | 划线结束灼烧 | |
目的 | 避免接种环上可能存在的微生物污染培养基 | 杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 | 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者 |
②在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。
③在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线。每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
（1）实验室常用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基培养细菌，牛肉膏能提供的主要营养有碳源、氮源、磷酸盐和维生素。培养酵母菌一般用麦芽汁琼脂培养基。
（2）据图分析可知，图示接种方法为平板划线法；对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线的目的是将聚集的菌体逐渐稀释分散以便获得由单个细胞繁殖而来的菌落。
（3）菌落是由一个细胞在固体培养基上繁殖而来的肉眼可见的子细胞群，因此单菌落可以看成一个种群；当两个或者多个细胞连在一起时平板上观察到的是一个菌落，所以稀释涂布平板法计算的数据要比实际活菌的数目少；此外，显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。
（4）振荡培养能提高培养液的溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。
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