Question

20．内皮素（ET）是一种含21个氨基酸的多肽，具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用，其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系．ET主要通过与靶细胞膜上的ET受体结合而发挥生物学效应．ET_A是ET的主要受体，科研人员试图通过构建表达载体，实现ET_A基因在细胞中高效表达，为后期ET_A的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等奠定基础．其过程如图所
示，图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为，限制酶XhoⅠ的识别序列为．请分析回答：
（1）完成过程 ①②③的目的是获取目的基因．
（2）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，除图示结构外，完整的基因表达载体还应具有复制原点、终止子等结构
（3）过程⑥中，要用CaCl₂预先处理大肠杆菌，使其成为处于容易吸收外界DNA的感受态的细胞．
（4）过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，形成的黏性末端是．
（5）基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中，不仅能有效改良植物的品 质．还由于叶绿体转基因不会随花粉（“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：①②③表示反转录法获得目的基因的过程，④表示构建基因表达载体，⑤表示限制酶切割质粒，⑥表示重组质粒导入受体细胞，⑦表示目的基因的检测．

解答 解：（1）过程①②③表示反转录法获得目的基因的过程．
（2）目的基因上游的启动子的作用是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因的转录，除图示结构外，完整的基因表达载体还应具有复制原点、终止子等结构．
（3）过程⑥中，要用CaCl₂预先处理大肠杆菌，使其成为处于容易吸收外界DNA的感受态的细胞．
（4）过程③和⑤利用限制酶XhoⅠ切割DNA获得目的基因的过程，限制酶使得DNA的磷酸二酯键断开，形成的黏性末端是．
（5）根据精子和卵细胞的减数分裂过程的区别可知，精子中基本不含有细胞质，因此基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中，由于叶绿体转基因不会随花粉传给后代，从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物．
故答案为：
（1）获取目的基因
（2）复制原点、终止子
（3）感受态
（4）
（5）花粉

点评 本题考查基因工程的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，能结合图中信息并运用所学知识综合分析问题和解决问题的能力．