Question

8．某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株．请回答：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以豆油为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于选择培养基．
（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置．为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行稀释处理．
（3）为了排除过程中的杂菌干扰，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照．
（4）为了筛选出菌株，可将适量的苏丹Ⅲ试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是透明圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶．
（5）纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用划线分离法接种于新的平板上，然后用接种环挑取单菌落至空白斜面，最后置于冰箱中保存．

Answer 1

分析 （1）培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．培养基的分类：①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．
（2）常用灭菌方法：灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌法．
培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌和消毒方法依次：高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、化学消毒、紫外线灭菌、巴氏消毒法．
（3）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．

解答 解：（1）欲筛选出能降解豆油的菌株，培养基中应只含有豆油而无其它碳源，不能降解豆油的细菌在此培养基上不能生存，从功能上讲，这类培养基属于选择培养基．
（2）为避免培养皿污染，需将培养皿呈倒置状态放置．为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进行梯度稀释处理．
（3）为了排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，需设置接种等量无菌水的培养基作为空白对照．
（4）由于脂肪遇苏丹Ⅳ试剂会出现红色，所以为了筛选出菌株，可将适量的苏丹Ⅳ试剂滴加在平板中的菌落周围，洗去浮色后，如果菌落周围的现象是出现透明圈、不出现红色圈，则说明此种菌能够分泌脂肪酶．
（5）分离纯化菌种时，需采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，然后用接种环挑取单菌落至空白斜面，最后置于冰箱中保存，使聚集在一起的细菌细胞分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便纯化菌种．
故答案为：
（1）豆油    选择    
（2）倒置   稀释   
（3）过程中的杂菌干扰    等量无菌水
（4）苏丹Ⅲ透明圈   
（5）划线分离（涂布分离）     冰箱

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的无菌技术，分离微生物的常用的接种方法和接种工具，主要考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．关键是运用所学过的知识点“透明圈”，进行知识点的迁移、类比，然后解决问题．