Question

13．使用PCR仪具体实验操作顺序应为（　　）
①设计好PCR仪的循环程序　
②按配方准备好各组分
③用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分　
④进行PCR反应　
⑤离心使反应液集中在离心管底部．

• A． ②③⑤④①
• B． ①⑤③②④
• C． ②③⑤①④
• D． ④②⑤③①

Answer 1

分析 PCR技术：
1、概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
2、原理：DNA复制．
3、前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
4、条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
5、过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．

解答 解：使用PCR技术的具体操作顺序是：按配方准备好各组分→用微量移液器将各组分依次加入微量离心管中→离心使反应液集中在离心管底部→设计好PCR仪的循环程序→进行PCR反应．
故选：C．

点评 本题比较基础，考查PCR技术的相关知识，只要考生识记PCR技术的操作顺序即可正确答题，属于考纲识记层次的考查．