Question

回答下列有关微生物的问题
Ⅰ．下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方．请回答：

试剂	牛肉膏	蛋白胨	NaCl	琼脂	水
用量	5g	10g	5g	20g	1 000mL

（1）培养基的类型有很多，但培养基中一般都含有水、碳源、

 

和无机盐．培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行

 

处理，常用的方法是

 

．
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是

 

和

 

．
（3）假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？

 

Ⅱ．植物的秸秆、枝叶等纤维物质是地球上最多的可再生资源，以纤维素类物质生成燃料乙醇的研究越来越受重视．纤维素酶糖化法是目前常用的方法，其操作过程如图所示：
（1）该方法中，微生物X与微生物Y不同，微生物Y是

 

．
（2）为了鉴别微生物X，培养基的成分为CMCNa、酵母膏、KH₂PO₄、琼脂、土豆汁等；在该培养基中，CMCNa的作用是

 

．
（3）若经选择，微生物X为木霉，则其内分解纤维素的酶至少包括

 

三种组分，这三种酶协同作用，将纤维素分解为葡萄糖．

Answer 1

考点：土壤中能分解纤维素的微生物及其应用价值,微生物的分离和培养

专题：

分析：1、据图分析：微生物X是纤维素分解菌，微生物Y是酵母菌．①表示筛选分离纤维素分解菌，②表示接种，③表示无氧发酵．
2、据表分析：微生物的培养基的主要营养成分有碳源、氮源、水和无机盐等，该培养基是牛肉膏蛋白胨固体培养基．

解答： 解：Ⅰ．（1）培养基的主要营养成分有碳源、氮源、水和无机盐等．培养基配制完成以后，要先调整pH，再灭菌，培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
（2）分离纯化微生物需要将微生物接种到固体培养基上，常用的方法是稀释涂布平板法和平板划线法．
（3）培养基上菌落连成一片，可能的原因是稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染．
Ⅱ．（1）据图分析：微生物Y是酵母菌．
（2）鉴别微生物X，培养基的成分为CMCNa的作用是作为唯一的碳源，对微生物起到选择作用．
（3）纤维素酶是一种复合酶，主要包括C₁酶、C_X酶、葡萄糖苷酶．
故答案为：
Ⅰ（1）氮源　灭菌　高压蒸汽灭菌
（2）平板划线法　稀释涂布平板法　
（3）稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染
Ⅱ（1）酵母菌　提供碳源（或便于鉴别）　
（2）C₁酶、C_X酶、葡萄糖苷酶

点评：本题主要考查微生物的培养和筛选分离，意在强化学生对相关知识的识记和理解，提高学生的实验技能．