Question

14．下图表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的研究，请分析回答下列问题．

（1）a过程表示基因工程，则其核心步骤是致癌基因表达载体的构建，图中的致癌基因作为目的基因，质粒作为载体，二者需要同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）切割后连接成重组载体．
（2）将基因表达载体导入ES细胞的方法是显微注射法，为检测致癌基因是否己插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术．
（3）b过程若要从早期胚胎中获得更多ES细胞，则可将早期胚胎培养至囊胚（时期）．
（4）d过程移入的胚胎能够存活，是因为代孕子宫并不会对其发生免疫排斥反应，同时能够与受体子宫建立正常的生理和组织联系联系．对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定．
（5）用肝癌细胞作抗原剌激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髄瘤细胞融合后获得细胞代谢产物为抗体（抗肝癌细胞抗体），经筛选的融合后细胞具有的特点是既能无限增殖又能产生特定抗体．该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞．

Answer 1

分析 分析图解：a表示将致癌基因导入小鼠的胚胎干细胞，b表示胚胎干细胞的体外培养，c表示利用早期胚胎培养技术获得早期胚胎，d表示胚胎移植技术，最终获得转基因小鼠．

解答 解：（1）基因工程的核心步骤为基因表达载体的构建，该过程首先要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（2）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法；检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用DNA分子杂交技术．
（3）胚胎干细胞来自早期胚胎（囊胚的内细胞团）和原始性腺，因此要从早期胚胎中获得更多ES细胞，则可将早期胚胎培养至囊胚期．
（4）d过程移入的胚胎能够存活，是因为代孕子宫并不会对其发生免疫排斥反应，同时能够与受体子宫建立正常的 生理和组织联系联系．对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定．
（5）用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，该细胞既能无限增殖又能产生特定抗体（抗肝癌细胞抗体）．
故答案为：
（1）致癌基因表达载体的构建       同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）
（2）显微注射法    DNA分子杂交
（3）囊胚      
（4）免疫排斥反应      生理和组织联系     滋养层
（5）抗体（抗肝癌细胞抗体）     既能无限增殖又能产生特定抗体

点评 本题综合考查了基因工程、细胞工程、胚胎工程等方面的知识，要求考生能够识记胚胎干细胞的特点和来源；识记动物细胞培养的培养液成分及作用；识记目的基因导入受体细胞的方法，再结合所学知识准确答题．