Question

14．某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验．实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数．请回答与此实验相关的问题．
（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和碳源．
（2）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样本的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃．要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验．
（3）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有多种细菌．一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越高（填“高”或“低”）．
（4）如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请分析接种的具体方法．

获得图A效果的接种方法是稀释涂布平板法，获得图B效果的接种方法是平板划线法．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染），应当怎样操作？增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）．
（5）如果在培养基中加入青霉素，可以用于筛选耐青霉素的真菌，这种培养基（按功能分）被称为选择培养基．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）蛋白胨来源于动物原料，含有维生素、糖和有机氮等营养物质，在培养基中主要作为氮源；淀粉是糖类，在培养基中主要作为碳源．
（2）要想使微生物快速的繁殖，就要置于适宜的条件，特别是温度，所以要置于恒温培养箱中；为了使结果更可靠，应进行对照实验，即同时取一个空白培养基接种无菌水作为对照放置于相同条件下培养．
（3）不同细菌形成的菌落形态、颜色等特征不同，因此如果观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有多种细菌．一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越高．
（4）图A中菌落均匀分布，接种方法是稀释涂布平板法，图B的接种方法是平板划线法．某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染），应当增大稀释倍数（或严格无菌操作）．
（5）如果在培养基中加入青霉素，可以用于筛选耐青霉素的真菌，这种培养基（按功能分）被称为选择培养基．
故答案为：
（1）氮源　碳源
（2）恒温培养箱　无菌水　
（3）菌落　高
（4）稀释涂布平板法　平板划线法　菌液浓度过高（或培养过程被杂菌污染）　增大稀释倍数（或严格无菌操作，原因与操作要对应）
（5）青霉素　选择培养基

点评 本题考查微生物的分离和培养、培养基对微生物的选择作用等知识，要求考生识记培养基的成分、无菌技术中的灭菌方法和微生物培养的条件，掌握培养基的种类及功能和实验设计的原则，再规范答题，属于考纲识记层次的考查．