题目内容

以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。

（1）获得目的基因的方法通常包括________和________。

（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是________和________。

（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或________，后者的形状成________。

（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率________，所以在转化后通常需要进行________操作。

（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和________序列上是相同的。

答案：
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ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？         。

PCR扩增DNA时必须加入引物，引物的实质是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                   。为消除PCR扩增过程当中外源DNA污染造成的影响，应如何设置对照？                       。

（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                        酶

对基因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的              键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是         ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用            制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

中国科学院动物研究所陈大元研究员带领的科研小组，首先选择了兔子卵细胞作为受体卵。他们采用了两种核移植方法，即电融合法和核直接注射法，把大熊猫的体细胞核移入兔的去核卵细胞质中。经过精心的实验，他们已得到了大熊猫的重组胚。实验结果显示，大熊猫的三种体细胞移植到兔去核卵母细胞中均可以卵裂，并进行早期发育，三种供体细胞核移植的融合率在55%～59%之间；融合后的重组卵进行培养后，囊胚率以乳腺细胞最高，而骨骼肌细胞的最低；重组囊胚细胞的染色体数目为42条，与供体（大熊猫）细胞染色体数目相同，与受体动物家兔的染色体数（44条）不同。经DNA指纹分析，也证明了重组囊胚细胞的遗传特性为大熊猫的遗传特性。实验还证明，卵细胞质使体细胞核去分化不具有特异性。大熊猫异种重组胚能否在寄母子宫着床乃至进行全程发育还是道难题，现正在深入实验。根据以上材料，回答下列问题：
（1）下面叙述除哪项外都是动物克隆技术的益处？_______    ___。
A.探索异种克隆技术，拯救濒危物种
B.克隆技术与转基因技术结合，使异种器官移植成为可能
C.克隆技术的重要性在于复制出一个动物或一批生物
D.克隆技术的研究将帮助人类认识衰老过程
（2）“去分化”是指__________________________________________________。
（3）细胞分化为囊胚，囊胚由许多细胞构成，其细胞增殖方式为_____________。
（4）科技预测：请预测大熊猫异种重组胚如果着床成功并顺利产生发育，其表现性状可能是（  ）
A.大熊猫的特点                       B.兔子的特点
C. 不具生殖能力             D. 兼有大熊猫与兔子的特点

ch1L基因是蓝藻拟核DNA上与叶绿素合成有关的基因。为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。构建过程如下：

第①步：用PCR技术从蓝藻环状DNA中扩增出ch1L基因片段。

第②步：将ch1L基因与质粒构建形成重组质粒1。

第③步：将重组质粒1中ch1L基因中部0.8kb片段删除，用一段红霉素抗性基因取代之，得到重组质粒2。

第④步：将重组质粒2导入蓝藻细胞，由于改造后的基因与ch1L基因仍有很长的序列相同，所以能准确地与其发生同源重组，产生出缺失ch1L基因的突变株。请根据上述资料，回答下列问题：

（1）第①步用PCR技术扩增DNA片段时用到的耐高温的酶通常是指什么酶？           。

PCR扩增DNA时必须加入引物，其作用是                                         。

（2）利用PCR技术扩增DNA一般要经过三十多次循环，每次循环都要经过三个步骤，其中“复性”这一步骤发生的变化是                                          。

（3）构建重组质粒1、2时，为保证成功率，往往使用                                  酶对基 因和质粒进行切割，以切出相同的黏性末端，便于连接。此酶的作用是将DNA分子的               键打开。

（4）质粒是基因工程中最常用的运载体，其化学本质是                      ，此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为运载体。

（5）导入重组质粒2以后，往往还需要进行检测和筛选，可用                   制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入              可将变异株细胞筛选出来。

 

中国科学院动物研究所陈大元研究员带领的科研小组，首先选择了兔子卵细胞作为受体卵。他们采用了两种核移植方法，即电融合法和核直接注射法，把大熊猫的体细胞核移入兔的去核卵细胞质中。经过精心的实验，他们已得到了大熊猫的重组胚。实验结果显示，大熊猫的三种体细胞移植到兔去核卵母细胞中均可以卵裂，并进行早期发育，三种供体细胞核移植的融合率在55%～59%之间；融合后的重组卵进行培养后，囊胚率以乳腺细胞最高，而骨骼肌细胞的最低；重组囊胚细胞的染色体数目为42条，与供体（大熊猫）细胞染色体数目相同，与受体动物家兔的染色体数（44条）不同。经DNA指纹分析，也证明了重组囊胚细胞的遗传特性为大熊猫的遗传特性。实验还证明，卵细胞质使体细胞核去分化不具有特异性。大熊猫异种重组胚能否在寄母子宫着床乃至进行全程发育还是道难题，现正在深入实验。根据以上材料，回答下列问题：

（1）下面叙述除哪项外都是动物克隆技术的益处？_______    ___。

A.探索异种克隆技术，拯救濒危物种

B.克隆技术与转基因技术结合，使异种器官移植成为可能

C.克隆技术的重要性在于复制出一个动物或一批生物

D.克隆技术的研究将帮助人类认识衰老过程

（2）“去分化”是指__________________________________________________。

（3）细胞分化为囊胚，囊胚由许多细胞构成，其细胞增殖方式为_____________。

（4）科技预测：请预测大熊猫异种重组胚如果着床成功并顺利产生发育，其表现性状可能是（  ）

A.大熊猫的特点                       B.兔子的特点

C. 不具生殖能力                     D. 兼有大熊猫与兔子的特点

 

（09湛江市一模）（10分）【现代生物科技专题】

A、为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的工具酶有                     。

（2）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用              技术，该技术的原理是                 。

（3）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的           做探针进行检测是否导入目的基因，又要用                法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

B、以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。

（1）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是             。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是           。再在37℃，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天以后看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎_________期开始的标志。

（2）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的全部基因来源于                                    。

（3）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因                                。

 

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