Question

16．自生固氮菌，能独立完成固氮作用，在农业生产中具有广泛的用途．研究人员从土壤中筛选高效的自生固氮菌株，并对其固氮能力进行了研究．请回答下列问题：
（1）为鉴别菌种，可以采用平板划线法或（稀释）涂布平板法法，在固体（物理性质）培养基上进行接种，观察所获单个菌落特征．
（2）以上操作过程中有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养微生物用的培养基与培养皿；②操作者的双手；③玻棒、试管、烧瓶和吸管．其中需要灭菌的是①③．（填序号）
（3）某同学待平板冷凝后，将平板倒置，他的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基，防止杂菌污染．经接种、培养后的菌落分布如右图所示，推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀．
（4）为了进一步筛选高效固氮菌，研究人员将上述获得的等量的四种固氮菌分别接种到等量的液体培养基中进行振荡培养相同时间后，对固氮菌进行计数并测定培养液中的含氮量，结果如表：

	甲菌	乙菌	丙菌	丁菌
菌量（个/mL）	2.1×105	2.5×105	1.8×105	2.0×105
含氮量（K）	3.32	4.38	5.34	5.36

①培养过程中需不断振荡的目的是让固氮菌与培养液充分接触．
②对固氮菌进行计数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少．
③由上表结果可知，丙菌的固氮效率最高．

Answer 1

分析 1、细菌菌落特征：菌落较小，形状表面或光滑黏稠，或粗糙干燥，易挑起，多为白色；而真菌落特征：菌落较大、菌丝细长，菌落疏松，呈绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状，无固定大小，多有光泽，不易挑，有时还呈现红色、褐色、绿色、黑色、黄色等不同的颜色（孢子的颜色）．
2、自生固氮菌是指在土壤中能够独立进行固氮的细菌，可以利用氮气作为氮源，所以培养基中不需要加氮源．
3、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法；鉴别菌种时应该在固体培养基上进行接种．
（2）①培养微生物用的培养基与培养皿需要进行灭菌处理；②操作者的双手需要用酒精消毒；③玻棒、试管、烧瓶和吸管需要灭菌处理．
（3）倒平板的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基，防止杂菌污染．图中菌落集中在某一区域，其原因可能是涂布不均匀．
（4）①为了让固氮菌与培养液充分接触，在培养过程中需不断振荡．
②若想对固氮菌进行计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法，由于一个菌落可能是由两个或多个细菌长成，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少．
③由上述结果可知，丙菌数量最少，但固氮量最多，因此可判断出丙菌的固氮效率最高．
故答案为：
（1）（稀释）涂布平板法    固体   
（2）①③
（3）防止皿盖上的水珠落入培养基，防止杂菌污染（答一点即可）      涂布不均匀
（4）①让固氮菌与培养液充分接触　②少　③丙

点评 本题考查结合表格数据，考查微生物分离和培养，要求考生识记培养基的成分、种类及作用；识记接种微生物常用的两种方法，能结合表中数据准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．