Question

3．多环芳烃菲是一种碳氢化合物，在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一．如图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株的主要步骤．请回答：

（1）步骤①→③的培养过程中，培养液中加入的多环芳烃菲可为微生物提供唯一碳源．
（2）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能增加培养液中的溶氧量．
（3）步骤④纯化菌株的方法为平板划线法．
（4）步骤④后的菌株培养须要倒置培养的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．
（5）接种环通过灼烧灭菌，完成步骤④中划线操作，共需灼烧接种环6次．

Answer 1

分析 1、培养微生物的培养基中的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等．
2、筛选目的微生物必须使用选择培养基，从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布培养→筛选菌株；常用的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法．
3、分析题图：题图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株的主要步骤，其中步骤①→③的培养过程中，培养液中加入多环芳烃菲作为唯一碳源，目的是筛选出目的菌株；该过程还需将锥形瓶放在摇床上振荡，目的有两个，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率，另一方面能增加培养液中的溶氧量；步骤④表示用平板划线法纯化菌株的过程，接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌．

解答 解：（1）多环芳烃菲是一种碳氢化合物，在步骤①→③的培养过程中，培养液中加入的多环芳烃菲可为微生物提供唯一碳源．
（2）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，目的有两个，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能增加培养液中的溶氧量．
（3）步骤④纯化菌株的方法为平板划线法．
（4）步骤④后的菌株培养须要倒置培养可防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．
（5）接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，以防止造成污染，因此完成步骤④共需灼烧接种环6次．
故答案为：
（1）唯一碳源
（2）增加培养液中的溶氧量
（3）平板划线法
（4）防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基
（5）6

点评 本题结合从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株的主要步骤和流程图，考查微生物的实验室培养和分离，意在考查考生的识记能力和识图能力；考生理解所学知识的要点、把握知识间内在联系、能对一些生物学问题和实验现象进行解释是解题的关键．