Question

9．如图为DNA粗提取过程中的一些重要操作，请据图回答下列问题．
（1）正确的操作顺序是C→B→E→D→A．
（2）C、E步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是加速血细胞的破裂和降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出．
（3）A步骤中所用酒精必须经过充分预冷才能使用，该步骤的目的是提取含杂质较少（或较纯净）的DNA．

Answer 1

分析 DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：
①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；
②DNA不容易酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；
③DNA对于酶、高温和洗涤剂的耐受性，蛋白酶能水解蛋白质，但是不能水解DNA，蛋白质不能耐受较高温度，DNA能耐受较高温度洗涤剂能瓦解细胞膜，但是对DNA没有影响；
④在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色．

解答 解：（1）DNA的粗提取和鉴定步骤是：加入蒸馏水，破碎细胞→过滤，获取含DNA的滤液→去除滤液中杂质→DNA的析出→鉴定．所以正确的操作顺序是C→B→E→D→A．
（2）C加蒸馏水是使血细胞吸水破裂，E加蒸馏水是使NaCl溶液的浓度降低，析出DNA．
（3）DNA不溶于酒精，95%的冷酒精凝集效果最佳，所以A步骤中所用酒精必须是经过充分预冷的才能使用，以便除去溶于酒精的杂质，提取含杂质较少（或较纯净）的DNA．
故答案为：
（1）C→B→E→D→A
（2）加速血细胞的破裂　   降低NaCl溶液的浓度，使DNA析出
（3）充分预冷　   提取含杂质较少（或较纯净）的DNA

点评 本题考查了DNA的粗提取与鉴定的相关知识，包括实验的原理、操作步骤等，意在考查考生的识记能力和实验操作能力，难度适中．考生要识记材料选择的原则、实验原理，注意DNA虽能溶于氯化钠溶液，但是在O.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低．对于DNA粗提取和鉴定实验的实验原理和具体操作步骤的掌握是本题解题的关键．