Question

16．根据如图1所示回答问题．请回答：

限制酶	BamHI	HindⅢ	EcoRI	SmaI	MspI
识别序列及切割位点

（1）天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有①②③④（填序号）．
①标记基因②多个限制酶切割位点③对受体细胞无害
④能自我复制⑤起始密码子
（2）若对天然质粒进行改造，插入的 SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性将会提高．
（3）在如图2上写出目的基因左右两侧分别被 SmaⅠ和 EcoRⅠ切割后的末端（答案写在答题纸的图上）哪一种基因工程的 基本工具可以连接平末端T₄DNA连接酶．

Answer 1

分析 1、分析题干：基因工程技术包含①目的基因的获取、②基因表达载体的构建、③将目的基因导入受体细胞、④目的基因的检测与表达．
2、载体具备的条件：
①能在受体细胞中复制并稳定保存．
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入．
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择．

解答 解：（1）天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体，经改造后的质粒同时具备的条件有①标记基因、②多个限制酶切割位点、③对受体细胞无害和④能自我复制，而⑤起始密码子位于mRNA上．
（2）碱基之间的配对遵循碱基互补配对原则，即C-G，A-T，且C和G之间有3个氢键，A和T之间有2个氢键，因此C和G的含量越高，DNA分子热稳定性也越高．SmaⅠ酶切位点中均为C-G碱基对，因此插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒中的C和G的含量就越高，其热稳定性也越高．
（3）据图分析得到在如图2上目的基因左右两侧分别被 SmaⅠ和 EcoRⅠ切割后的末端是，基因工程中用T₄DNA连接酶连接平末端．
故答案为：
（1）①②③④
（2）提高
（3）           T₄DNA连接酶

点评 本题结合图表，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及其特点；识记基因工程的操作步骤，掌握其应用，能根据图中和表中信息选择合适的限制酶，再结合所学的知识准确答题．