Question

2．科研人员先分别PCR扩增尿酸酶基因和原核生物胞外蛋白信号肽基因（编码的肽链能引导新合成的蛋白质转移、分泌），再将它们拼接形成融合基因，并导入大肠杆菌生产尿酸酶．相关叙述正确的是（　　）

• A． 扩增两类基因时可以通过设计引物来控制两类基因的拼接方向
• B． 构建融合基因的目的是使大肠杆菌能合成尿酸酶并分泌到细胞外
• C． 融合基因导入大肠杆菌前需构建基因表达载体，以保证目的基因正常表达和遗传
• D． 在导入融合基因前，应先用NaCl处理大肠杆菌，使其变为感受态细胞

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．
将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用 Ca²⁺处理细胞，使其成为 感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测和个体水平上的鉴定．

解答 解：A、每个基因的两端都有启动子和终止子，它会调节基因的表达，因此扩增两类基因时可以通过设计引物来控制两类基因的拼接方向，以便它们都能正常表达，A正确；
B、根据题干中原核生物胞外蛋白信号肽基因的功能可知，构建融合基因的目的是使大肠杆菌能合成尿酸酶并分泌到细胞外，B正确；
C、融合基因导入大肠杆菌前需构建基因表达载体，以保证目的基因正常表达和遗传，C正确；
D、在导入融合基因前，应先用CaCl₂处理大肠杆菌，使其变为感受态细胞，D错误．
故选：ABC．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤等，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学知识准确判断各项．