Question

15．临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用平板划线法或稀释涂布平板法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得．
（2）取该单菌落适当稀释，用稀释涂布平板法接种于固体培养基表面，注意接种量小于0.1毫升，将平板倒置放在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A弱；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的耐药菌．
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素A．

Answer 1

分析 （1）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．
（2）根据材料分析，透明圈的出现，说明该菌不能生长．

解答 解：（1）微生物分离与培养过程中，分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法．
（2）取该单菌落适当稀释，用稀释涂布平板法接种于固体培养基表面，注意接种量小于0.1毫升，并且将平板倒置放在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
（3）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱．据此可判断抗菌强弱依次是A、C、B；D的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性．
（4）根据（3）的分析，实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好．
故答案为：
（1）平板划线法　   稀释涂布平板
（2）稀释涂布平板     0.1       倒置
（3）敏感    不敏感　 该致病菌对C的敏感性比对A弱   耐药菌
（4）A

点评 本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养过程中的接种方法，具有一定的分析实验结果获取结论的能力和利用所学的微生物知识解决生活问题的能力．