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生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗,科学家发现,在微生物从产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柒油(如下图)。

(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用_______、_______方法从油料作物中提取。

(2)筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供______,培养基灭菌采用的最适方法是________法。

(3)测定培养液中微生物数量,可选用________法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测________,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。

(4)若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的__________技术。

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