Question

5．为了分离和计数土壤中分解尿素的细菌，配制如下培养基进行实验．回答下列问题：

KH2PO4	NaHPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	琼脂	H2O
1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g	1000mL

（1）从功能上看该培养基是选择培养基；尿素的作用是提供氮源；鉴定尿素是否被分解可加酚红试剂．
（2）在实验操作过程中，下列材料或用具：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手．需要灭菌的是：①和②（填序号）．
（3）实验操作步骤中若取土样lg，因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，将l0⁴～l0⁷倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上培养，在对应稀释倍数为10⁶的培养基中统计3个平板上的菌落数．为保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数，若3个平板菌落数分别为219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为1.145×10⁹个．

Answer 1

分析 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验中，需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，计数的关键是经梯度稀释后的学生倍数要合适，计数时通常选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数．

解答 解：（1）根据题意可知，该培养基要分离和计数土壤中分解尿素的细菌，因此从功能上看该培养基是选择培养基，并且尿素应该作为该培养基的唯一氮源；鉴定尿素是否被分解可加酚红试剂．
（2）①培养细菌用的培养基与培养皿和②玻棒、试管、锥形瓶和吸管，需要灭菌，而③实验操作者的双手需要消毒．
（3）实为保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数．在对位稀释倍数为10⁶的培养基中统计3个平板上的菌落数分別为：219、212、256，则每克该土壤样品中的菌株数为=（219+212+256）÷3×10⁶÷0.2=1.145×10⁹个．
故答案为：
（1）选择    提供氮源    酚红
（2）①和②
（3）30～300       1.145×10⁹

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分、种类以及培养基的制备，能够根据表格获取有效解题信息，难度适中．