Question

18．临床上某些疾病的治疗需要器官移植，但是又普遍存在供体器官不足工器官移植后免疫排斥的问题，为了解决这些问题，人们提供了很多设想，请回答下列问题：
（1）免疫排斥主要是由T细胞引起的，临床上通常使用免疫抑制剂药物来抑制该细胞的增殖，从而提高器官移植的成功率．
（2）从新生儿脐带血分离出部分细胞保存，需要器官移植的时候进行自体移植，在这些细胞培养液中需加入分化诱导因子，才能培育出需要的器官，但是这些细胞不同于ES细胞，因为ES细胞来源于早期胚胎或性腺细胞，功能上具有发育的全能性．
（3）利用核移植技术获得器官：哺乳动物核移植分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植两种类型，后一种方式可以取病人的体细胞，注入处于减数第二次分裂中时期的次级卵母细胞细胞中，通过电刺激方法促使融合，进一步诱导其发育成特定器官．
（4）利用基因工程提供供体，科学家正试图利用基因工程对小型猪的器官进行改造，在改造中导入抑制抗原表达的基因，通常需要使用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，如果已知目的基因的核苷酸排列顺序，通常采用逆转录方法人工合成获取目的基因，获取目的基因与载体结合形成重组DNA分子，将其导入受精卵内通常采用显微注射法技术，再进一步培育成所需的转基因猪．

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）免疫排斥主要是细胞免疫，由T细胞引起的，T细胞在胸腺中发育成熟．临床上通常使用免疫抑制剂药物来抑制该细胞的增殖，
（2）从新生儿脐带血分离出部分细胞为造血干细胞，属于功能干细胞，在培养液中加入（分化）诱导因子可以诱导干细胞向不同类型的组织细胞分化；ES细胞具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显，来源于早期胚胎或原始性腺；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞．
（3）哺乳动物核移植分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植两种类型，前一种方法成功率较高，后一种方式可以取病人的体细胞，注入处于减数第二次分裂中时期的次级卵母细胞细胞中，通过电刺激方法促使融合，进一步诱导其发育成特定器官．
（4）构建基因表达载体时，通常需要使用的工具酶有限制酶和DNA连接酶，如果已知目的基因的核苷酸排列顺序，通常采用逆转录方法人工合成获取目的基因，获取目的基因与载体结合形成重组DNA分子，将其导入受体细胞内，动物通常采用显微注射法技术．
故答案为：
（1）T 
（2）分化诱导  性腺 
（3）胚胎细胞  减数第二次分裂中  次级卵母细胞 
（4）限制酶和DNA连接酶  逆转录  重组DNA分子  显微注射法

点评 本题考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、工具及操作步骤，明确受体细胞不同时，导入目的基因的方法也不同，再结合所学的知识准确判断解答，属于考纲识记层次的考查．