题目内容

12．基因工程的设计和操作中，启动子是运载体的重要组成部分．如图是一种克隆启动子的办法，请据图分析回答：

（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．若要获得启动子的碱基序列不能依据基因表达产物推知，原因是基因中启动子的碱基序列不能被转录．
（2）过程①、③分别使用的限制酶是BamHⅠHindⅢ．
（3）过程④的原理是DNA双链复制，需要用到的工具酶是Taq酶等热稳定聚合酶．
（4）过程⑤中克隆的启动子与外源基因连接时，根据外源基因的核苷酸序列设计引物a．

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位．基因中启动子的碱基序列不能被转录，因此要获得启动子的碱基序列不能依据基因表达产物推知．
（2）根据过程①后的结果可知，该过程使用的限制酶是BamHⅠ；根据过程③的结果可知，该过程使用的限制酶是HindⅢ．
（3）过程④采用PCR技术进行扩增，其原理是DNA双链复制；PCR操作是在较高温度下进行的，因此需要用到的工具酶是Taq酶等热稳定聚合酶．
（4）PCR技术的前提条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．因此，过程⑤中克隆的启动子与外源基因连接时，根据外源基因的核苷酸序列设计引物a．
故答案为：
（1）RNA聚合酶     基因中启动子的碱基序列不能被转录
（2）BamHⅠHindⅢ
（3）DNA双链复制     Taq酶等热稳定聚合酶
（4）外源基因的核苷酸序列

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题．

练习册系列答案
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A．②③B．①④C．①②D．③④
17．下列关于细胞的结构与功能的叙述，正确的是（　　）
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2．下列关于细胞结构和功能的叙述中，正确的是（　　）
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④蓝藻细胞中含有藻蓝素和叶绿素，所以也能进行光合作用
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⑥蛙的成熟红细胞常被选为获取纯净细胞膜的材料
⑦与动物细胞有丝分裂有关的细胞器只有中心体．
A．①②⑥B．①②④C．①②④⑦D．③④⑤⑥

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