Question

19．目的基因与载体结合所需的条件一般有（　　）
①同种限制酶　 ②具有抗性基因的质粒　③RNA聚合酶　  ④目的基因　⑤DNA连接酶　⑥四种脱氧核苷酸．

• A． ①②③④⑤⑥
• B． ①②④⑤⑥③
• C． ①②③④⑤
• D． ①②④⑤

Answer 1

分析 基因表达载体的构建：
1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用．
2、基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
（1）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选．

解答 解：①构建基因表达载体时，首先要用同种限制酶切割运载体和含有目的基因的DNA片段，①正确；　
②构建基因表达载体时需要运载体，运载体一般是具有抗性基因的质粒，②正确；　
③RNA聚合酶能催化转录过程，但基因表达载体的构建过程不需要RNA聚合酶，③错误；　 
④构建基因表达载体时需要目的基因，④正确；　
⑤构建基因表达载体时需要DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子，⑤正确；　
⑥构建基因表达载体时，不需要四种脱氧核苷酸，⑥错误．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题，能结合所学的知识准确判断各选项．