题目内容

11.尿素分解菌能在如表所示配方的培养基上生长、形成菌落.
KH2PO41.4g
Na2HPO42.1g
MgSO4•7H2O0.2g
葡萄糖10.0g
尿素1.0g
琼脂15g
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000ml
回答下列问题:
(1)从物理形态上看,上述培养基属于固体培养基;从用途上看,上述培养基属于选择(性)培养基.
(2)当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,此时平板上的菌落数较能准确地反映样品中的活菌数.
(3)培养过程中,常选择菌落数在30〜300的平板统计计数,统计的菌落数往往比活菌的真实数数目低,原因是两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落.
(4)尿素分解菌经X射线照射后不能正常生长,添加某种维生素后能正常生长,试解释其原因:经X射线照射后导致尿素分解菌发生基因突变,从而缺少合成某种维生素必需的酶.

分析 1、培养基按物理性质分:

名称特征功能
固体培养基外观显固体状态的培养基主要用于微生物的分离、鉴定
液体培养基呈液体状态的培养基主要用于工业生产
2、培养基按功能分:
种类制备方法特征用途
选择培养基培养基中加入某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选率加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌
鉴别培养基加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应,产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌
3、统计菌落数目的方法
(1)稀释涂布平板法(间接)
①当样品的稀释庋足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数.
(2)利用显微镜直接计数

解答 解:(1)培养基配方中含有琼脂(凝固剂),所以是固体培养基;培养基中的氮源只有尿素,因此能筛选出尿素分解菌,属于选择培养基.
(2)当样品稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌,此时通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中的活菌数;为了保证结果准确,一般选择菌落数在30〜300的平板进行计数.即使样品稀释度足够高,但仍有可能两个或多个细菌细胞连到一起,此时平板上观察到的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的真实数数目低.
(3)用X射线照射尿素分解菌,可能诱导其发生基因突变,若基因突变使尿素分解菌缺少合成某种维生素必需的酶,则不能在缺某种维生素的培养基中生长.
故答案为:
(1)固体     选择(性)
(2)样品稀释液中的一个活菌
(3)30〜300       两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的是一个菌落
(4)经X射线照射后导致尿素分解菌发生基因突变,从而缺少合成某种维生素必需的酶

点评 本题涉及选修1模块“生物技术实践”中微生物的培养和计数等知识,要求考生识记接种微生物常用的两种方法;识记培养基的组成成分、种类及功能;掌握微生物计数的方法及注意事项,能结合所学的知识准确答题.

练习册系列答案
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3.肥胖已经严重危害人类健康.为研究发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响,科研人员进行了相关实验.
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(3)将一定数目的植物乳杆菌接种到经过(高压蒸汽)灭菌处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中,制备发酵大麦提取物(LFBE).除不接种植物乳杆菌外,其余操作方法相同,制备未发酵大麦提取物(RBE).
(4)研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响,实验处理及结果如下.(表格中+表示加入了该物质,-表示未加入)
        组别

处理方法
模型组空白组对照组(提取物浓度ug/mL)实验组(提取物浓度ug/mL)
100200400100200400
培养液++++++++
1INS.DEX.IBMX+-------
  2RBE--+++---
  3LFBE-----+++

①表格处理方法1、2、3分别是INS.DEX.IBMX、RBE、LFBE.
②分析实验结果,说明LFBE明显抑制3T3-L1前脂肪细胞分化且随浓度增加,抑制能力加强.
(5)为进一步研究LFBE抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的机理,科研人员提取各组细胞中总RNA,经逆转录过程获得cDNA,再利用PCR技术扩增出肥胖相关基因.在相同条件下,PCR产物的量可以间接反映细胞中肥胖相关基因mRNA的含量.若检测结果是LFBE组肥胖相关基因mRNA数量明显低于模型组和RBE组,高于空白组,则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3-L1前脂肪细胞分化.

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