Question

13．浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素--油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢．用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因（如P450基因和红霉素抗性基因）表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外．某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题．

（1）步骤①用PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）；步骤②用到的酶有限制酶和DNA连接酶．
（2）图中导入重组质粒的方法是转化法，在导入之前应用氯化钙溶液处理受体细菌．
（3）PCR技术的原理是DNA的复制（或DNA分子的复制）；在培养基中加入红霉素可将含有目的基因的细胞筛选出来．

Answer 1

分析 分析题图：图中①表示采用PCR技术扩增目的基因，②表示基因表达载体的构建过程，③表示将目的基因导入受体细胞，④⑤表示筛选过程．

解答 解：（1）PCR技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）；②为基因表达载体的构建过程，该过程首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（2）图中受体细胞是微生物细胞，将目的基因导入微生物细胞常用农杆菌转化法，即用氯化钙溶液处理受体细菌，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态．
（3）PCR技术的原理是DNA的复制（或DNA分子的复制）；由图可知，抗性基因是红霉素基因，因此在培养基中加入红霉素可将含有目的基因的细胞筛选出来．
故答案为：
（1）热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）　限制酶和DNA连接酶　
（2）转化法　氯化钙溶液
（3）DNA的复制（或DNA分子的复制）　红霉素

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题．