题目内容

14．某研究小组从牛的瘤胃中采集样本，进行分解尿素的微生物的分离与计数．实验基本步骤如下：

（1）分解尿素的微生物含有脲酶（分解尿素的酶），因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成氨（NH3）使培养基的碱性增强．
（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起凝固剂作用；培养基中添加酚红作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带．
（3）对尿素溶液进行灭菌的最适方法是D灭菌．
A．高压蒸汽 B．干热 C．添加抗生素 D．过滤 E．紫外线照射 F.70%酒精浸泡
（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45．据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的微生物活菌数为4.7×108，理论上，统计的菌落数往往低（低、等、高）于接种的实际活菌数目．

分析 1、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞．微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子．
2、由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．
3、实验室常用的灭菌方法：
①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；
③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30 min．

解答 解：（1）分解尿素的微生物含有脲酶（分解尿素的酶），因此，配制培养基时以尿素作为唯一氮源，尿素会被分解成氨（NH3）使培养基的碱性增强．
（2）配制培养基时，需添加琼脂，琼脂起凝固剂作用；培养基中添加酚红作为指示剂，可使目标菌落的周围产生红色环带．
（3）由于尿素在高温下会分解，所以对尿素溶液的灭菌要采用G6玻璃漏斗过滤的方法．
（4）该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格；然后将1mL瘤胃样液稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为49、47和45．因此据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素的（1L=1000mL）中的活菌数=$\frac{49+47+45}{3}$×1000×10×1000=4.7×108．由于每个菌落可能是一个或多个活菌增殖而来，统计的菌落数往往低于接种的实际活菌数目．
故答案为：
（1）脲酶（分解尿素的酶）      氨（NH3）
（2）凝固剂      酚红
（3）D
（4）检测培养基平板灭菌是否合格     4.7×108       低

点评 本题主要考查微生物的培养、分解尿素的细菌的鉴定等知识点，明确相关的知识点，正确的解答相关的试题．

练习册系列答案
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观察下图，下列叙述错误的是（ ）

A．若该图表示的是细胞的各化学元素的含量，则A应该为碳元素

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5．某校学生在开展研究性学习时，进行了人类遗传病方面的调查研究，发现一家族中有的成员患甲种遗传病，有的成员患乙种遗传病．如图是该校学生根据调查结果绘制的该家族遗传系谱图，现已查明，Ⅱ6不携带致病基因．下列对该家族系谱的分析判断中，正确的是（　　）
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2．研究人员对草原生态系统进行了相关的生态学调查．在无迁入、迁出的情况下绘制出某昆虫种群数量的λ值随时间的变化曲线如图1．请分析回答下列问题：

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9．如图中若黄雀的全部同化量来自两种动物一一食草昆虫和螳螂，且它们各占一半，则当绿色植物增加G千克时，黄雀增加体重最多是多少千克（　　）
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19．请根据不同鼠种性状遗传研究的结果分析回答下列问题．
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．
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6．将番茄和水稻分别培养在含Mg2+、Ca2+、SiO44-的培养液中，假设两植物的吸水速率相同，一段时间后，测定培养液中各离子浓度，结果如图所示．有关该实验的表述正确的是（　　）
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赤霉素促进促进促进抑制抑制
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（4）温带地区，许多植物在冬季来临之前落叶纷纷，这一现象的出现主要是由于脱落酸和乙烯作用的结果，其意义是降低蒸腾作用，以利于度过寒冷的冬季．

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