Question

10．【加试题】生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的．请回答下列问题：
（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌．检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释．
（2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀涂布到LB固体培养基，倒置于恒温培养箱，在37℃条件进行培养．用该方法统计样本菌落数时需要（填需要或不需要）设置对照组．
（3）如图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是C．

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置
B．步骤②接种环火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线
C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落
D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数．

Answer 1

分析 1、稀释涂布法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养．在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落．能够测定样品中活菌数的方法是：稀释涂布平板法．
2、由图可知，①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养．

解答 解：（1）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌．检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释．
（2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀涂布到LB固体培养基，为了防止冷凝水污染培养基，因此需要将培养基 倒置于恒温培养箱，在37℃条件进行培养．用该方法统计样本菌落数时需要设置空白对照组．
（3）A、倒完平板后立即盖上培养皿，冷却后将平板倒过来放置，A错误；
B、步骤②接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以沾取菌液后平板划线，B错误；
C、步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，C正确；
D、步骤④培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行分离得到纯种，平板划线法不能对微生物进行计数，D错误．
故答案为：
（1）高压蒸汽灭菌    无菌水
（2）涂布    倒置     37      需要         
（3）C

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生掌握无菌技术的主要内容，掌握稀释涂布平板法和平板划线法的操作步骤以及应用区别，明确只有稀释涂布平板法能够对微生物进行计数．