Question

2．图是“微生物平板划线”示意图，划线的顺序为①→②→③→④→⑤．下列有关叙述正确的是（　　）

• A． 操作前用无水乙醇对接种人员的双手进行灭菌处理
• B． 划线操作时，把培养皿盖完全打开，在酒精灯火焰上方进行
• C． 在⑤区域中才可以得到所需菌落
• D． 在①②③④⑤每个区域的划线前后都要对接种环灭菌

Answer 1

分析 平板划线的操作的基本步骤是：
1、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞．
2、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面．
3、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连．
4、将平板倒置，放入培养箱中培养．

解答 解：A、操作前用70%的酒精溶液对接种人员的双手进行消毒处理，不能进行灭菌处理，A错误；
B、划线操作时培养皿盖不要完全打开，且须在酒精灯火焰周围进行，以防空气中杂菌污染，B错误；
C、在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；
D、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，D正确．
故选：D．

点评 本题主要考查平板划线法的操作步骤及注意事项，意在提高学生实验中无菌操作意识和相关实验技能．