题目内容
现代生物技术及其应用：嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-葡萄糖苷酶（BglB）是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：
【利用大肠杆菌表达BglB】
（1）PCR 扩增bglB基因时，选用
（2）如图为质粒限制酶酶切图谱．bglB基因不含图中限制酶识别序列，为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入
（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述构建好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为
考点：基因工程的原理及技术
专题：
分析：基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
目的基因应插入启动子和终止子之间．
限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
目的基因应插入启动子和终止子之间．
解答：
解：（1）根据题意可知，嗜热土壤芽胞杆菌产生β-葡萄糖苷酶（BglB），因此PCR扩增bglB基因时，选用嗜热土壤芽孢杆菌基因组DNA作模板．
（2）根据启动子和终止子的生理作用可知，目的基因应导入启动子和终止子之间．图中看出，两者之间存在于三种限制酶切点，但是由于Xbal在质粒不止一个酶切位点，因此为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入NdeⅠ和BamHⅠ不同限制酶的识别序列．
（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶．
故答案为：
（1）嗜热土壤芽孢杆菌
（2）NdeⅠBamHⅠ
（3）转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶
（2）根据启动子和终止子的生理作用可知，目的基因应导入启动子和终止子之间．图中看出，两者之间存在于三种限制酶切点，但是由于Xbal在质粒不止一个酶切位点，因此为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入NdeⅠ和BamHⅠ不同限制酶的识别序列．
（3）大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶．
故答案为：
（1）嗜热土壤芽孢杆菌
（2）NdeⅠBamHⅠ
（3）转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶
点评：本题考查基因工程原理，考查学生分析问题和解决问题的能力．
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| 反应温度℃ | 40 | 60 | 80 | 40 | 60 | 80 |
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