题目内容

2．将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力．以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表．

表1 引物对序列表
引物对AP1 AACTGAAATGTAGCTATC
引物对BP2 TTAAGTCCATTACTCTAG
表2 几种限制酶识别序列及切割位点表
限制酶AluⅠEcoRⅠPstⅠSmaⅠ
切割位点AG↓CT
TC↑GA		G↓AATTC
CTTAA↑G		CTGCA↓G
G↑ACGTC		CCC↓GGG
GGG↑CCC
请根据以图表回答下列问题．
（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是耐高温．
（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定．表1根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图．请判断哪一对引物可采用较高的退火温度引物对B．
（3）目的基因插入质粒后，不能影响质粒的复制．载体构建过程需要的工具酶为限制酶和连接酶
（4）图1步骤3所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求否
（5）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤6转基因所用的细菌B通常为农杆菌．
（6）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断．
①采用EcoRI和PstI酶切，得到2种DNA片断．
②采用EcoRI和SmaI酶切，得到1种DNA片段．

分析 PCR技术是在体外对DNA进行扩增，所用的DNA聚合酶与体内DNA聚合酶不同，是耐高温的DNA聚合酶，过程为变性使DNA分子两条链鈖旋开来，复性是让引物与DNA解旋开来的单链互补配对，延伸是在DNA聚合酶的作用在引物引导下合成子代DNA分子．耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，而A与T之间只有两个氢键．

解答 解：（1）PCR方法扩增目的基因的过程中，需要进行高温解链过程，因此使用的DNA聚合酶要具有耐高温的特性．
（2）耐高温的DNA分子中通常含有G与C碱基比例大，因为它们之间形成三个氢键，稳定性强．引物B中含C与G的碱基对较多，可采用较高的退火温度．
（3）
（4）多种限制酶切割，形成不同的切割位点，所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列就没有专一性要求．
（4）植物基因工程中，将目的基因导入受体细胞常用农杆菌转化法，因此常用农杆菌做受体细胞．
（5）据图分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段产生了X、Y两个片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割质粒产生了 M、N两个片段，且M、N片段间存在Pst I酶切点．因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割这两片段形成的重组质粒，由于保留了Pstl的切割位点，所以可以得到两种DNA分子，而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重组质粒中，只能产生一种DNA片断．
故答案为：
（1）耐高温  
（2）引物对B  
（3）复制 限制酶 连接酶  
（4）否    
（5）农杆菌    
（6）①2  ②1

点评 本题具有一定的难度，考查了运用PCR方法扩增目的基因的有关知识，意在考查考生的图解识别能力，尤其是限制酶的作用是解答本题的难点和关键点；能够识记PCR技术中DNA聚合酶耐高温的特点；识记DNA分子中C-G碱基对稳定强．

练习册系列答案
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下列关于动植物细胞的结构与功能的叙述，正确的是

A．包括核糖体和线粒体的膜结构在内，动植物细胞具有完整的生物膜系统

B．动植物细胞都以DNA为遗传物质，以ATP为生命活动的直接能源物质

C．植物细胞与动物细胞的最外层不同，因而两者生命系统的边界也不同

D．动植物细胞的代谢均需要相关激素的调节，且激素的受体均位于细胞膜上
15．如图为正常人体内组织细胞与内环境之间物质交换示意图．其中
①②③④分别表示体液成分．a、b、c、d、e表示物质运输途径．
（1）人体内的化学反应主要发生在①②③④中的③； 如果蛋白质摄入不足或④回流受阻，都会导致组织水肿（组织液增多）．
（2）如果③为骨骼肌细胞，当人体剧烈运动时，通过HCO3-
（物质）的调节作用，①中的pH值基本不变．
（3）如果③为肝细胞，当正常人摄入高糖食物后，①中由胰岛B细胞分泌的胰岛素含量上升，胰岛B细胞合成并分泌该物质时，需要细胞的哪些结构参与？核糖体、内质网、高尔基体、线粒体、细胞膜．在该物质调节下，通过a、e途径的葡萄糖大于（大于、等于、小于）b、d途径．
（4）当①中水分减少时，其浓度改变会刺激下丘脑渗透压感受器兴奋，最终使垂体释放抗利尿激素，促进对肾小管和集合管水分的重新吸收，使尿量减少，以维持内环境水的平衡．
12．下表比较了植物体细胞杂交和动物细胞融合的有关内容，其中不正确的有（　　）
类别植物体细胞杂交动物细胞融合
基本原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞的全能性
融合方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、生物方法
典型应用杂种植物单克隆抗体的制备
培养基
区别		葡萄糖可为离体组织提供营养和调节渗透压动物血清不可缺少
A．0处B．1处C．2处D．3处
18．如图表示高等生物细胞有氧呼吸过程的图解，据图回答：
（1）④、⑤、⑥代表能量，其中最多的代号是⑥．
（2）请写出①所代表的物质名称丙酮酸．
（3）[H]与O2结合生成②的过程，发生的场所是线粒体内膜．
（4）如果O2供应不足，则人体内C6H12O6的分解产物是乳酸，反应场所是细胞质基质．
7．下列这些行为，我们应该支持的是（　　）
A．对流感病毒基因进行改造，以使具有某种易感基因的民族感染这种病毒，而施放国的人却不易感染
B．在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，反对生物武器及其技术和设备的扩散
C．用重组技术制造全新的致病菌
D．将蜡状杆菌改造成像炭疽杆菌那样的致病菌
14．下列有关生物体内信息分子作用部位的叙述中，正确的是（　　）
A．小肠黏膜产生促胰液素，通过体液的传送可作用于胰岛细胞
B．突触前膜释放神经递质，可以作用于肌肉和某些腺体
C．下丘脑产生的激素可作用于甲状腺，后者分泌的激素也可作用于下丘脑
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11．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．回答下列问题：
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