Question

9．恒化器是微生物连续培养时使用的大型容器，容器中一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要．研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，在恒化器内连续培养773代，然后取样分析其中存在的新菌株．请回答下列问题：
（1）用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基属于液体培养基．培养基中除了含葡萄糖作为碳源外，还应该含有氮源、水、无机盐．
（2）对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐．进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，反过来CV103不能在过滤的培养过CV101的培养基中生长，据此作出的推测是：CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源．请设计并完成下列实验步骤，来验证你的观点．
①配制CV101以CV103产生的醋酸盐为碳源的培养基；
②将CV101和CV103菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况．
③预期实验结果：以醋酸盐为唯一碳源 CV101能生长、CV103不能生长．

Answer 1

分析 1、培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答 解：（1）由题意可知，连续培养的培养基是液体培养基；培养基的基本营养成分包括碳源、氮源、水、无机盐，其中葡萄糖作为碳源．
（2）由题意可知，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，由此可以推出CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源．若要验证CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源这一推论，就要配制以醋酸盐为唯一碳源的培养基，将CV101和CV103菌株分别接种到新配制的培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况，如果CV101菌株能生长，CV103菌株不能生长，则说明推论是正确的．
故答案为：
（1）液体培养基     碳源         氮源、水、无机盐
（2）CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源     
①CV101以CV103产生的醋酸盐为碳源
③CV101能生长、CV103不能生长

点评 本题考查微生物分离和培养，要求考生识记培养基的基本成分、种类及功能；识记接种微生物常用的两种方法，再根据题干信息准确答题．