Question

14．组织型纤溶酶原激活剂（tPA）在人体纤溶和凝血的平衡调节中发挥着关键性的作用，如图是利用奶牛乳汁生产组织型纤溶酶原激活剂（tPA）的图解，据图回答下列问题：
（1）过程①在构建的基因表达载体中，应将tPA基因首端与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合，③过程常用的方法是显微注射法．
（2）要获得单个成纤维细胞，过程②需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理奶牛胎儿皮肤组织块．在单个组织细胞的培养过程中，为了防止杂菌污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素．
（3）成功进入成纤维细胞的tPA基因，最终在转基因牛C中维持稳定和表达的过程称为转化，④涉及到的生物技术为细胞核移植技术，得到的转基因牛C称之为转基因克隆动物．
（4）从A到B过程中所用的胚胎工程技术是早期胚胎培养．从个体水平上看，若转基因牛的乳汁中产生组织型纤溶酶原激活剂，则可确定转基因牛培育成功．

Answer 1

分析 分析题图：②是动物细胞培养过程，需要先用胰蛋白酶将细胞分散成单个细胞；①是目的基因（血清白蛋白基因）；③表示采用转基因技术，将目的基因（血清白蛋白基因）导入受体细胞的过程；④是细胞核移植；⑤为早期胚胎的培养；⑥表示胚胎移植过程．

解答 解：（1）过程①为构建的基因表达载体过程，应将tPA基因首端与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件结合形成重组DNA，③过程为导入受体细胞的过程，常用的方法是显微注射法．
（2）动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶（胶原蛋白酶）处理动物组织，以获得单个细胞．故要获得单个成纤维细胞，过程②需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理奶牛胎儿皮肤组织块．在单个组织细胞的培养过程中，为了防止杂菌污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素．
（3）成功进入成纤维细胞的tPA基因，最终在转基因牛C中维持稳定和表达的过程称为转化，④为克隆过程，涉及到的生物技术为细胞核移植技术，得到的转基因牛C称之为转基因克隆动物．
（4）从A到B过程中所用的胚胎工程技术是早期胚胎培养．若转基因牛的乳汁中产生组织型纤溶酶原激活剂，则说明转基因已经表达，可确定转基因牛培育成功．
故答案为：
（1）乳腺蛋白    显微注射法
（2）胰蛋白酶或胶原蛋白酶    抗生素
（3）转化    细胞核移植技术
（4）早期胚胎培养   转基因牛的乳汁中产生组织型纤溶酶原激活剂

点评 本题结合乳腺生物反应器的制备过程图，综合考查基因工程、动物体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植、胚胎分割等技术，要求考生识记基因工程的操作步骤及应用，能准确判断图中各过程的名称；识记动物细胞培养的过程；识记胚胎移植的过程．